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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 加酶切位点后扩增不出来了，在线求助
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笨笨的云

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 781055707 at 2017-03-08 07:52:44
可以的，不过你要把PCR产物纯化下，或跑个30个循环，取个0.1，0.2,0.3,0.4,0.5UL做模板，我做巢式PCR和重叠PCR用的都是PCR产物。做科研没有绝对的不能用，主要看方法和大胆的尝试。...

嗯嗯，好的，谢谢你的建议。还是要多尝试。
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活到老学到老
11楼2017-03-09 09:00:40
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笨笨的云

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 原海亮 at 2017-03-08 19:13:51
你的模板是什么呢，基因组还是质粒？加了酶切位点后，是什么都扩增不出来，还是扩增出来但特异性不好？实在不行用比较笨的方法，你可以用不加酶切位点的引物扩增，然后连接T载体，然后提质粒，再用加酶切位点的引物 ...

我用基因组做模板，扩出来什么条带都没有，今天准备做T克隆，连到T载体上用质粒扩会比基因组好扩一点吗？
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活到老学到老
12楼2017-03-09 19:47:52
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