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提剑的书生

新虫 (小有名气)

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[交流] 有关液相的几个问题

1、液相和液质连用的前期处理是否完全一致？
2、正相和反相液相色谱法有何区别？是在仪器上进行设置吗？
3、液相是一种什么方法，比如我做类胡萝卜素，液质是为了提取，检测，分析还是分离什么的。
4、不同物种的同一物质，液相的前期处理是否一致？例如要做a，b两物种的液相。

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1楼 2017-02-19 13:02:30

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Bookaholic

铜虫 (著名写手)

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引用回帖:

4楼: Originally posted by 提剑的书生 at 2017-02-21 08:57:05
首先感谢您的回答，然后我还有几个问题想请您解答一下。
1、对于上面问题1和4，如果都是做色素的话，是否可以保持一致。
2、液质联用和液相相比有何区别。
3、液质联用一般上样量大吗？
...

1、你这样问我只能说可以，如果发现出问题再改呗
2、液质联用就是还要液相分离后再加个质谱检测
液质联用要注意流动相选择（下面是转载的）
通常，反相高效液相色谱常用的溶剂，如水、甲醇和乙腈等都十分有利于电喷雾离子化，但纯水或纯有机溶剂作为流动相不利于去溶剂或形成离子；在高流速情况下，流动相含有少量水或至少 20%~30%的有机溶剂有助于获得较高的分析灵敏度。其他适用的溶剂还包括四氢呋喃、丙酮、分子量较大的醇类（如异丙醇、丁醇）、二氯甲烷、二氯甲烷-甲醇混合物、二甲亚砜及二甲基甲酰胺，但需注意二氯甲烷、二甲亚砜及二甲基甲酰胺等有机溶剂对 PEEK 材料管道的作用；四氢呋喃易燃，且对许多有机溶剂有良好的溶解性（能溶解聚乙烯、聚丙烯及氟树脂以外的所有有机化合物，特别是对聚氯乙烯、聚偏氯乙烯等），应慎用。烃类（如正己烷）、芳香族化合物（如苯）以及四氯化碳等溶剂不适合 ESI。液相色谱常使用缓冲盐和添加剂来控制流动相 pH，以保证色谱峰适宜的分离度、保留时间及峰形。但目前还没有一个真正的 LC-MS 接口完全兼容含不挥发缓冲盐和添加剂的流动相，因此硫酸盐和磷酸盐应避免在 LC-MS 分析中使用。挥发性酸、碱、缓冲盐，如甲酸、乙酸、氨水、醋酸铵、甲酸铵等，常常用于LC-MS分析。为减少污染，避免化学噪声和电离抑制，这些缓冲呀或添加剂的量都有一定的限制，如甲酸、乙酸、氨水的浓度应控制在 0.01%~1%（V/V）之间；醋酸铵、甲酸铵的浓度最好保持在 20mmol/L 以下；强离子对试剂三氟乙酸会降低 ESI 信号，若流动相中含有 0.1%（V/V），可以通过柱后加入含有 50%丙酸的异丙醇溶液来提高分析灵敏度。
3、一般不大，跟分析液相差不多吧