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[求助]
关于pull down实验，求大神进来指导一下 已有2人参与
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| 最近做Pull down 实验验证酵母双杂交筛选的结果，在酵母双杂交实验中，筛选到3个可能的互作蛋白，所以再做了pull down再进行体外验证，pull down 构建目的蛋白表达时，试了很多的载体，后面只有pMAL-c2x这个载体在上清中表达我的目的蛋白，其他GST，HIS标签的pGEX6P-1等载体目的蛋白均在沉淀。现在想进行下一步实验验证酵母双杂结果与目的蛋白在体外是否互作，请教各位我下一步是不是要构建酵母双杂交筛选蛋白的其他标签的蛋白载体？（是否只要能让改蛋白表达就可以的标签载体？）然后过柱纯化，挂柱，WB验证？请做过的各位老师，同学指导一下，谢谢 |
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