| 查看: 3409 | 回复: 4 | ||
[求助]
关于pull down实验，求大神进来指导一下 已有2人参与
|
| 最近做Pull down 实验验证酵母双杂交筛选的结果，在酵母双杂交实验中，筛选到3个可能的互作蛋白，所以再做了pull down再进行体外验证，pull down 构建目的蛋白表达时，试了很多的载体，后面只有pMAL-c2x这个载体在上清中表达我的目的蛋白，其他GST，HIS标签的pGEX6P-1等载体目的蛋白均在沉淀。现在想进行下一步实验验证酵母双杂结果与目的蛋白在体外是否互作，请教各位我下一步是不是要构建酵母双杂交筛选蛋白的其他标签的蛋白载体？（是否只要能让改蛋白表达就可以的标签载体？）然后过柱纯化，挂柱，WB验证？请做过的各位老师，同学指导一下，谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner
已经有0人回复
-
GSPT1口服分子胶降解剂MRT-2359 | Biochempartner
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有264人回复
-
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner
已经有0人回复
-
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
-
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
-
DMXAA：从血管破坏剂到STING通路研究的关键工具分子 | Biochempartner
已经有0人回复
-
靶向PD-L1的人源化单克隆抗体阿特珠单抗
已经有0人回复
-
"探针之父"(+)-JQ-1如何改变表观遗传研究 | Biochempartner
已经有0人回复
-
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
11103324
银虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1437.9
- 红花: 4
- 帖子: 173
- 在线: 124.5小时
- 虫号: 2990334
- 注册: 2014-02-24
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2017-02-16 10:19:51
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 908 (博后)
- 金币: 17360.6
- 散金: 1672
- 红花: 121
- 沙发: 41
- 帖子: 14578
- 在线: 2196.9小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
3楼2017-02-16 17:24:56
4楼2017-04-19 17:24:03
5楼2017-06-05 10:06:23