24小时热门版块排行榜    

查看: 1377  |  回复: 8
【悬赏金币】回答本帖问题,作者19910204将赠送您 10 个金币

19910204

新虫 (小有名气)

[求助] 大分子片段如何跑胶(20-40kb)已有4人参与

我的插入基因大小大概是20-40kb,现在想检测是否成功转入,一般的琼脂糖凝胶电泳好像无法检测分辨,请教大家有啥其他的好方法吗?谢啦。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keke226

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
找个几个合适的内切酶分别切一下再跑?

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

读书廿年倦写字,如今翻书不识志,若知眷书悔前程,无如渔樵未识时。三年担柴熟山性,三年苦网谙水汹,前程在心自倦舒,识志何用书中清。
2楼2017-01-18 19:35:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sky蒲公英

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-01-22 07:52:56
先做pcr验证是否存在该基因,然后根据酶切位点选择合适的内切酶,单酶切或者双酶切都可以。不过最可靠的就是测序了。

发自小木虫Android客户端
知识就像蒲公英的花儿一样,播种在世界的每一个角落。
3楼2017-01-18 20:03:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

19910204

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by keke226 at 2017-01-18 19:35:37
找个几个合适的内切酶分别切一下再跑?

酶切试过了,但是只跑出来一条10kb左右的带
4楼2017-01-18 20:03:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keke226

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 19910204 at 2017-01-18 20:03:55
酶切试过了,但是只跑出来一条10kb左右的带...

多用几种酶试试吧。一种酶切一次也不一定准。

发自小木虫Android客户端
读书廿年倦写字,如今翻书不识志,若知眷书悔前程,无如渔樵未识时。三年担柴熟山性,三年苦网谙水汹,前程在心自倦舒,识志何用书中清。
5楼2017-01-18 20:20:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

igoandsee

铜虫 (初入文坛)

设计几对引物分别p下  有结果 建议直接做后续  测序挺慢的

发自小木虫Android客户端
6楼2017-01-19 09:13:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hch123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-01-22 07:53:48
检一下接头地方,如果都有的话,基本没问题。可以往下做,同时送测
脚踏实地:遇一个,学一个,会一个。。。
7楼2017-01-19 12:16:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

铁杆木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-01-22 07:53:27
直接PCR检测,引物分别设计在载体和插入片段上。
阳性克隆测序确定。
8楼2017-01-21 21:58:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

铁杆木虫 (文坛精英)

引用回帖:
8楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-01-21 21:58:42
直接PCR检测,引物分别设计在载体和插入片段上。
阳性克隆测序确定。

大片段容易出现中间缺失,一定要通测。
9楼2017-01-21 21:59:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 19910204 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2024杰青和万人领军什么时候会评 +5 墨香琴韵 2024-06-02 5/250 2024-06-02 19:31 by xiaqiu
[基金申请] 入职高校3年发表10+SCI,尽人事听天命 +33 kaoyan250 2024-05-27 48/2400 2024-06-02 19:17 by kaoyan250
[基金申请] +5 河马の史诗 2024-06-02 5/250 2024-06-02 19:05 by 328838485
[硕博家园] 各位同学能否分享一下实验室的学生劳务发放标准呀? +19 ma3252788 2024-05-30 19/950 2024-06-02 18:15 by Lcy6666
[考博] 申请2024或2025年博士研究生 +5 嘟噜嘟1 2024-05-29 12/600 2024-06-01 22:36 by 嘟噜嘟1
[考研] 研0二导师分到新来的博士后靠谱吗 +7 sone9 2024-05-31 7/350 2024-06-01 19:10 by 梦燕园
[教师之家] 研究生在毕业答辩时挂了,遗憾 +10 spacr2022 2024-05-27 13/650 2024-06-01 17:45 by keyaner23
[论文投稿] 求Sci期刊推荐 10+4 甄小鱼 2024-05-30 7/350 2024-06-01 10:41 by bobvan
[基金申请] 博后特别资助状态变化 +24 随梦而飞2017 2024-05-30 35/1750 2024-06-01 10:10 by 青岛阳仔
[考博] 广东以理材料系碳点与功能材料课题组 — 2博士名额 / 科研助理 +4 小城夜很美 2024-05-27 11/550 2024-05-31 21:26 by 小城夜很美
[硕博家园] 求问endnote上Wiley引用格式在哪下载 +3 Elon. 2024-05-30 3/150 2024-05-31 10:13 by crazy peng
[有机交流] 液相纯度高,但产品析不太出来 10+4 cui19236 2024-05-27 9/450 2024-05-30 07:45 by yuanjijoy
[论文投稿] 《控制理论与应用》期刊收版面费吗? +4 ygj2015 2024-05-29 4/200 2024-05-30 06:59 by nono2009
[硕博家园] 又想换工作 +15 brightmj 2024-05-27 20/1000 2024-05-29 23:25 by zyqchem
[论文投稿] 真急着毕业,CPB主编终审17天了,邮件催稿了两次,就是一点动静没有 5+3 kkkk夏 2024-05-28 6/300 2024-05-29 11:18 by hitsdu
[论文投稿] 核心初审被拒,理由是“选题的意义不明确,文章写得不像是科技论文”,怎么改 5+3 工藤雷花樱 2024-05-27 8/400 2024-05-29 10:09 by topedit
[论文投稿] EI学报,一审返修后,为啥不再送审,直接终审中? +4 qweasd12345 2024-05-27 6/300 2024-05-29 00:02 by dut_ameng
[基金申请] E05青基有几个评审 +4 KYXY123 2024-05-28 4/200 2024-05-28 19:25 by popt2t
[论文投稿] EI期刊审稿人邮箱问题 5+3 shier妈妈 2024-05-27 4/200 2024-05-28 14:53 by topedit
[有机交流] 奇怪的物质 100+4 桃桃PXS 2024-05-27 7/350 2024-05-28 10:22 by 091602
信息提示
请填处理意见