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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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29806824

管理员

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[交流] 求助HPLC分离方法

我正在摸索高效液相的条件,样品从0-5分钟出现了许多峰,无法分开,已经用甲醇:水5:95和乙腈:水0.5:99.5试过了,都无法很好的分离开来,磷酸、醋酸以及甲酸配比的水相也试过了,请各位高手给点建议啊,谢谢了,急!
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chgli1981

超级版主

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clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~! 不过楼主还是应该说的再详细点。 呵呵
你做的什么样品啊,是否可以考虑换一种柱子
2楼2008-12-14 14:27:06
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applecm

版主

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能不能说明一下你要分离的是哪类化合物,性质如何,极性大吗
3楼2008-12-14 15:09:29
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蓝宝石1984

专家顾问

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先搞清楚你样品的性质,再选择柱子和流动相
4楼2008-12-14 16:35:40
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micar

专家顾问

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对的,都没有说清楚~
5楼2008-12-14 18:18:00
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polycao

实习版主

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xy4585618(金币+1,VIP+0):3Q
1 换耐水色谱柱,用纯水流动相
2 加离子对试剂
6楼2008-12-15 10:58:14
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29806824

管理员

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救命啊

我的药材是白毛夏枯草,用甲醇 超声提取的,后来又处理了一批是用甲醇超声后用石油醚萃的,文献报道里面的成分主要是二萜、黄酮、甾酮以及少量的糖、苷,极性应该不是很高的,现在主要就是从0~5分钟出现了一堆分不开的峰,所以就请教各位大侠指点,谢谢啦!
7楼2008-12-15 12:25:12
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yxiuzhi

实习版主

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你用的什么样的柱子啊,把你的色谱条件告诉大家,让大家帮你分析到底是哪里出了问题
8楼2008-12-15 17:08:25
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inthesun

主管区长

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lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
0-5min出峰比较多,如果是反相柱的话可能是你的甲醇含量太高了,试试走梯度,或者用较低浓度的甲醇水试试
9楼2008-12-15 21:45:11
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tangyumin

超级版主

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xiaohezi7844(金币+1,VIP+0):thanks
我经常跑的前面的峰都是色素、多酚、糖类的东西,一般都是水溶性的,应该没有你想要的东西,那些东西反倒会降低分析效果,因为前面的峰太高导致真正想要的化合物峰很低,看不到了。C18反相柱一般水最高就用到95%,再高当心柱子塌掉!你可以先走一个梯度洗脱,95%的水到0%的水,看看你的其他东西主要在什么地方出峰。可以加TFA或者HCOOH改善峰型。
10楼2008-12-16 22:59:00
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