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29806824

金虫 (初入文坛)

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专业: 中药学其他科学问题

[交流] 求助HPLC分离方法

我正在摸索高效液相的条件，样品从0-5分钟出现了许多峰，无法分开，已经用甲醇:水5：95和乙腈：水0.5：99.5试过了，都无法很好的分离开来，磷酸、醋酸以及甲酸配比的水相也试过了，请各位高手给点建议啊，谢谢了，急！

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1楼 2008-12-14 13:09:44

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chgli1981

铁杆木虫 (著名写手)

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★
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~！不过楼主还是应该说的再详细点。呵呵

你做的什么样品啊，是否可以考虑换一种柱子

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2楼2008-12-14 14:27:06

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applecm

铁虫 (初入文坛)

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专业: 药物分析学

能不能说明一下你要分离的是哪类化合物，性质如何，极性大吗

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3楼2008-12-14 15:09:29

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蓝宝石1984

金虫 (初入文坛)

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先搞清楚你样品的性质，再选择柱子和流动相

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4楼2008-12-14 16:35:40

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micar

新虫 (小有名气)

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专业: 中药质量评价

对的，都没有说清楚~

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5楼2008-12-14 18:18:00

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polycao

金虫 (小有名气)

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★
xy4585618(金币+1,VIP+0):3Q

1 换耐水色谱柱，用纯水流动相
2 加离子对试剂

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6楼2008-12-15 10:58:14

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29806824

金虫 (初入文坛)

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救命啊

我的药材是白毛夏枯草，用甲醇超声提取的，后来又处理了一批是用甲醇超声后用石油醚萃的，文献报道里面的成分主要是二萜、黄酮、甾酮以及少量的糖、苷，极性应该不是很高的，现在主要就是从0~5分钟出现了一堆分不开的峰，所以就请教各位大侠指点，谢谢啦！

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7楼2008-12-15 12:25:12

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yxiuzhi

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专业: 药物分析

你用的什么样的柱子啊，把你的色谱条件告诉大家，让大家帮你分析到底是哪里出了问题

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8楼2008-12-15 17:08:25

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inthesun

木虫 (正式写手)

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★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~

0-5min出峰比较多，如果是反相柱的话可能是你的甲醇含量太高了，试试走梯度，或者用较低浓度的甲醇水试试

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9楼2008-12-15 21:45:11

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tangyumin

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★
xiaohezi7844(金币+1,VIP+0):thanks

我经常跑的前面的峰都是色素、多酚、糖类的东西，一般都是水溶性的，应该没有你想要的东西，那些东西反倒会降低分析效果，因为前面的峰太高导致真正想要的化合物峰很低，看不到了。C18反相柱一般水最高就用到95%，再高当心柱子塌掉！你可以先走一个梯度洗脱，95%的水到0%的水，看看你的其他东西主要在什么地方出峰。可以加TFA或者HCOOH改善峰型。

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10楼2008-12-16 22:59:00

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