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29806824

金虫 (初入文坛)

[交流] 求助HPLC分离方法

我正在摸索高效液相的条件,样品从0-5分钟出现了许多峰,无法分开,已经用甲醇:水5:95和乙腈:水0.5:99.5试过了,都无法很好的分离开来,磷酸、醋酸以及甲酸配比的水相也试过了,请各位高手给点建议啊,谢谢了,急!
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tangyumin


xiaohezi7844(金币+1,VIP+0):thanks
我经常跑的前面的峰都是色素、多酚、糖类的东西,一般都是水溶性的,应该没有你想要的东西,那些东西反倒会降低分析效果,因为前面的峰太高导致真正想要的化合物峰很低,看不到了。C18反相柱一般水最高就用到95%,再高当心柱子塌掉!你可以先走一个梯度洗脱,95%的水到0%的水,看看你的其他东西主要在什么地方出峰。可以加TFA或者HCOOH改善峰型。
10楼2008-12-16 22:59:00
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chgli1981

铁杆木虫 (著名写手)


clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~! 不过楼主还是应该说的再详细点。 呵呵
你做的什么样品啊,是否可以考虑换一种柱子
2楼2008-12-14 14:27:06
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applecm

铁虫 (初入文坛)

能不能说明一下你要分离的是哪类化合物,性质如何,极性大吗
3楼2008-12-14 15:09:29
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蓝宝石1984

金虫 (初入文坛)

先搞清楚你样品的性质,再选择柱子和流动相
4楼2008-12-14 16:35:40
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