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新虫 (初入文坛)

[求助] 有做过果胶含量测定的吗?尤其是咔唑硫酸法。做了很多次,都做不下去了已有1人参与

有做过果胶含量测定的吗?尤其是咔唑硫酸法。做了很多次,都做不下去了
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新虫 (初入文坛)

有没有啊,求助
2楼2016-12-23 10:48:47
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新虫 (初入文坛)

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3楼: Originally posted by mixi113 at 2016-12-25 12:08:06
请具体说明试验出现的问题,这样我也方便给出有针对性的解决办法。一般这个实验出现问题的地方是硫酸,硫酸必须是优级纯的,而非分析纯的。一般硫酸常含有大于10万分之一以上浓度的铁离子。铁离子会干扰试验,使颜色 ...

1、咔唑溶于无水乙醇,我的溶解不了,在磁搅拌器下转了超久,而且还加温了,但是始终无法溶解。溶液里很多颗粒,静止后会有很多悬浮在里面。
2、查了很多方法,也试了3-4种了,加药顺序不一样,硫酸;标准液有前后之分?会不会影响实验?我始终无法做出标准曲线,我的OD应该是递增的,可是数据一会大,一会小,一会成负的了、做了平行试验(同一浓度做3个,可是3个都差很多,不知道为什么会这样?是什么影响比较大,比如时间?还是?)
3.我的硫酸是分析纯98的,溶液最终是红棕色的,没出现绿色,所以还需要换硫酸吗?(硫酸不太好买了,,现在危化品查的严)
4.操作过程,有的是85度水浴30min,有的是沸煮10min,还有需要最后加完咔唑静止30Min?哪个正确?有没有具体做过的?给个方案?
5.试管整个过程需不需要加盖?一篇06年英文文献上说了加盖,加的,不加的我都试过了,反正都没得到一条递增直线(递增数据)
6.求求,指导下吧。做了块1个月了。不知道具体问题出在哪里了
4楼2016-12-25 22:30:45
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新虫 (初入文坛)

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5楼: Originally posted by mixi113 at 2016-12-26 08:59:48
1.咔唑溶于无水乙醇的速率偏慢,我一般是隔夜使用。这样会好一些。
2.使用其中的一种方法即可。只要按照方法执行就行。OD有负值,甚至平行的差异都比较大。这种情况,我还没有碰到!请问空白溶液加完咔唑后是什么 ...

1.隔夜后会发现咔唑乙醇的溶液上层澄清,下层都是碎粉末。我用的时候应该摇匀还是取上清?
2.。。。。。你竟然没遇到过,为什么我的OD值丝毫没有规律。。。空白加完是棕色有点暗棕色。红棕色那种。加完后都摇匀了。我觉得每个都摇匀过程中很费时间,会不会是时间有影响。我是摇匀一个试管就放进去水浴的、对了!!!!我用的是流动水冷浴,没有条件冰浴,会不会影响呢???
3.好的。
4.我暗处60min试试。
5.好的、
6楼2016-12-26 20:46:07
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7楼: Originally posted by mixi113 at 2016-12-27 11:35:09
1.摇匀。本身咔唑在乙醇中的溶解度就很小,只要保证是饱和溶液就行。
2.(1)按说的话,空白是不应该产生红棕色的,最多是浅红色。实在不行就更换一下咔唑试剂。
(2)有个说法是“加完咔唑试剂后,千万不要摇晃 ...

1和2、3我都试试。
4,我用的是学校自制的蒸馏水,我现在回想,可能问题出在蒸馏水上,我第一次借别人的蒸馏水,基本是出来一条斜线的,但是后来我自己去取得蒸馏水就老是在出问题,我觉得可能水有问题。我正在小办法换水。超级感谢您。这个问题真的困扰很久了
8楼2016-12-27 13:26:22
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9楼: Originally posted by mixi113 at 2016-12-27 17:57:49
我也是过来人,也被很多实验困扰过。希望这些回复能够帮上一些忙。楼主加油!...

对了,果胶好像也不溶于水啊?反正是溶的少 ,所以需要用缓冲溶液溶吗?我查的方案都没有用缓冲溶液,都是说用水,可是我溶解不完全。有很多小细粉末。
10楼2016-12-28 10:01:11
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11楼: Originally posted by mixi113 at 2016-12-29 13:53:56
果胶有可溶性果胶和原果胶。原果胶必须降解成可溶性果胶才行。

暂时出来标准直线了,但是感觉重复性不是很好,今天测了下样品,原纤维上的果胶含量比工艺方法处理完后的果胶含量多。这个理论结果应该是反过来。。。我真是。。。这个实验好费时间,时间好宝贵。明天再做一遍试试
12楼2016-12-29 21:46:36
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3楼: Originally posted by mixi113 at 2016-12-25 12:08:06
请具体说明试验出现的问题,这样我也方便给出有针对性的解决办法。一般这个实验出现问题的地方是硫酸,硫酸必须是优级纯的,而非分析纯的。一般硫酸常含有大于10万分之一以上浓度的铁离子。铁离子会干扰试验,使颜色 ...

还在吗?我始终无法溶解咔唑!你们是用什么溶解的?我用无水乙醇溶解不了啊,磁转子搅拌几个小时了,加温也不行,这个不均匀没法做后期实验啊,影响太大了,数据颜色都不正常,求求说下具体步骤吗?是不是要精制乙醇??可是有的文献就是写用无水乙醇啊
13楼2017-01-04 22:31:44
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新虫 (初入文坛)

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14楼: Originally posted by mixi113 at 2017-01-06 12:01:56
咔唑本身是稍溶于乙醇的,也就是说溶解度很小。我也没有很好地办法。...

好吧,那我取溶了的清液(应该是饱和液)然后定容到100试试吧
15楼2017-01-06 15:07:39
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