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丫丫2016

银虫 (正式写手)

[求助] 变性聚丙烯酰胺凝胶实验 已有1人参与

在进行6%变性聚丙烯酰胺凝胶实验时,据说要用玻璃硅烷和亲和硅烷涂玻璃板,这两种硅烷的作用是什么?可以不涂吗?@starseacow
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遨游科研世界的小鱼
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秋天的童话V5

金虫 (著名写手)

做大板的时候要涂。但我一般只涂亲和硅烷,如果不涂的话一泡胶就掉了。

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4楼2016-12-21 16:35:08
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小鸟游佑太

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
丫丫2016: 金币+3, 有帮助 2016-12-17 15:23:57
我一般都不涂,玻璃的话用酸或碱清洗干净,ddH2O润洗后,干燥就可以用了,塑料板的话需要涂抹各种消除极性的材料,防止塑料板对蛋白产生吸附作用。
2楼2016-12-17 11:51:28
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丫丫2016

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小鸟游佑太 at 2016-12-17 11:51:28
我一般都不涂,玻璃的话用酸或碱清洗干净,ddH2O润洗后,干燥就可以用了,塑料板的话需要涂抹各种消除极性的材料,防止塑料板对蛋白产生吸附作用。

谢谢大神指点!!!

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遨游科研世界的小鱼
3楼2016-12-17 15:23:42
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丫丫2016

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 秋天的童话V5 at 2016-12-21 16:35:08
做大板的时候要涂。但我一般只涂亲和硅烷,如果不涂的话一泡胶就掉了。

后面的过程不就是要把胶弄下来,再显色什么的吗?难道是夹在玻璃板里面进行后面的操作吗?

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遨游科研世界的小鱼
5楼2016-12-22 12:09:58
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丫丫2016

银虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 丫丫2016 at 2016-12-22 12:09:58
后面的过程不就是要把胶弄下来,再显色什么的吗?难道是夹在玻璃板里面进行后面的操作吗?
...

我第一次做这个胶,做成了下面的样子。第一个图是软件显示的结果,第二个图是我用手机拍的,总觉得有很多问题,但没经验,一时找不出,请大神指点!!!
变性聚丙烯酰胺凝胶实验


变性聚丙烯酰胺凝胶实验-1



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遨游科研世界的小鱼
6楼2016-12-22 12:11:20
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秋天的童话V5

金虫 (著名写手)

小板的胶厚一点,可以直接泡脱下来,进行后面的步骤不影响。大板的胶太薄,泡下来就碎了,所以要涂。你这个跑之前多冲一下点样孔吧,连marker都跑得不像样,还是说没跑marker。ps,我也不是什么大神。

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7楼2016-12-22 13:32:38
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丫丫2016

银虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 秋天的童话V5 at 2016-12-22 13:32:38
小板的胶厚一点,可以直接泡脱下来,进行后面的步骤不影响。大板的胶太薄,泡下来就碎了,所以要涂。你这个跑之前多冲一下点样孔吧,连marker都跑得不像样,还是说没跑marker。ps,我也不是什么大神。
...

没有跑marker ,因为还没来得及买。就是点样孔冲的时候用10ul的枪,在最底下的老是冲不出来,胶孔又小,除了小枪似乎没什么工具适合了。请问你是用什么冲的呢?
还有我没有涂各种硅烷,胶也没碎,只不过必须要很小心。不碎就不用涂那些硅烷了吧?^_^  非常谢谢你指点

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遨游科研世界的小鱼
8楼2016-12-22 15:23:33
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秋天的童话V5

金虫 (著名写手)

10的枪肯定冲不出来。用量程大的。比如100,1000的换着来。要把残胶冲干净了跑出来的图才能看。

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9楼2016-12-22 17:19:21
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秋天的童话V5

金虫 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 秋天的童话V5 at 2016-12-22 17:19:21
10的枪肯定冲不出来。用量程大的。比如100,1000的换着来。要把残胶冲干净了跑出来的图才能看。

对了。试试用带针头的注射器。

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10楼2016-12-22 18:05:11
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