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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳。急
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z631535213

木虫 (正式写手)

[求助] 求助DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳。急 已有1人参与

楼要鉴别长度分别为179bp，182bp，185bp，188bp的PCR产物，听虫友说非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可以鉴别出来。
楼的实验室里现有琼脂糖凝胶电泳设备，电源电压可以有600V。

之前一直没接触过聚丙烯酰胺凝胶电泳，想请问下：
1、用于区分楼的实验的DNA，聚丙烯酰胺凝胶电泳是不是一定要用垂直槽？能不能用凝胶电泳的水平槽？
2、染料能不能使用Gelred或4S Red Plus
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1楼 2015-12-18 15:12:47
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joeming123

银虫 (小有名气)
片段区别太小，琼脂糖胶应该分不出来。
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现在的路越来越难走
2楼2015-12-18 16:27:54
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z631535213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by joeming123 at 2015-12-18 16:27:54
片段区别太小，琼脂糖胶应该分不出来。

是的，所以考了用聚丙烯酰胺凝胶电泳。
之前用琼脂糖是为了验证设计的几对引物行不行，现在把设计的几对引物放在一个体系里面弄多重PCR，就要区别出PCR产物了
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3楼2015-12-18 16:39:27
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early趣多多

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by z631535213 at 2015-12-18 16:39:27
是的，所以考了用聚丙烯酰胺凝胶电泳。
之前用琼脂糖是为了验证设计的几对引物行不行，现在把设计的几对引物放在一个体系里面弄多重PCR，就要区别出PCR产物了...

楼主后来做出来了么，求具体步骤
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4楼2017-01-04 10:56:55
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cyan幽月

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也是用的GELRED，可以的，后面还不用洗色那些，染色了就可以直接看到
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5楼2018-08-22 23:09:13
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Jackonwang

金虫 (著名写手)
你这个差别太小了很难区分

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6楼2018-08-23 00:47:02
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匆匆wency

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cyan幽月 at 2018-08-22 23:09:13
我也是用的GELRED，可以的，后面还不用洗色那些，染色了就可以直接看到

gelred和dna浓度比大概是多少哇？我的都没有显示出来

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7楼2018-10-30 21:30:39
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