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z631535213

木虫 (正式写手)

[求助] 求助DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳。急 已有1人参与

楼要鉴别长度分别为179bp,182bp,185bp,188bp的PCR产物,听虫友说非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可以鉴别出来。
楼的实验室里现有琼脂糖凝胶电泳设备,电源电压可以有600V。

之前一直没接触过聚丙烯酰胺凝胶电泳,想请问下:
1、用于区分楼的实验的DNA,聚丙烯酰胺凝胶电泳是不是一定要用垂直槽?能不能用凝胶电泳的水平槽?
2、染料能不能使用Gelred或4S Red Plus
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joeming123

银虫 (小有名气)

片段区别太小,琼脂糖胶应该分不出来。
现在的路越来越难走
2楼2015-12-18 16:27:54
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z631535213

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by joeming123 at 2015-12-18 16:27:54
片段区别太小,琼脂糖胶应该分不出来。

是的,所以考了用聚丙烯酰胺凝胶电泳。
之前用琼脂糖是为了验证设计的几对引物行不行,现在把设计的几对引物放在一个体系里面弄多重PCR,就要区别出PCR产物了
3楼2015-12-18 16:39:27
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early趣多多

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by z631535213 at 2015-12-18 16:39:27
是的,所以考了用聚丙烯酰胺凝胶电泳。
之前用琼脂糖是为了验证设计的几对引物行不行,现在把设计的几对引物放在一个体系里面弄多重PCR,就要区别出PCR产物了...

楼主后来做出来了么,求具体步骤
4楼2017-01-04 10:56:55
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cyan幽月

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也是用的GELRED,可以的,后面还不用洗色那些,染色了就可以直接看到
5楼2018-08-22 23:09:13
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Jackonwang

金虫 (著名写手)

你这个差别太小了很难区分

发自小木虫IOS客户端
6楼2018-08-23 00:47:02
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匆匆wency

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by cyan幽月 at 2018-08-22 23:09:13
我也是用的GELRED,可以的,后面还不用洗色那些,染色了就可以直接看到

gelred和dna浓度比大概是多少哇?我的都没有显示出来

发自小木虫IOS客户端
7楼2018-10-30 21:30:39
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