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请教一下原核生物基因串联表达的问题 已有5人参与
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| 我想以多顺反子的形式在大肠杆菌里用质粒共表达两个基因，然而第一个基因正常表达，第二个基因却表达不出来（蛋白胶上没带）。我设计时在两个基因中间加了20个bp的间隔区，其中7~12bp的位置是一段SD序列。请问问题出在哪里呢？是间隔区太短还是出了移码的问题？ |
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2楼2016-12-14 10:43:40
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质粒是普通的pet26b。第一个基因后面是一个限制酶位点，紧接着一段6bp的sd序列（和质粒上一样），后面跟第二个基因隔了一段6bp的间隔区（就是基因组中第二个基因上游6bp的片段）。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-12-15 09:19:40
ganchao1776
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你是要两个蛋白串起来吗？如果是中间设计好连接桥就可以了，无需SD序列。如果是要两个蛋白共表达，建议你用pETDuet载体试试，该载体有两个多克隆位点 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-12-15 09:48:23
5楼2016-12-26 19:51:06
6楼2016-12-29 18:07:47
wangsongwei
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7楼2017-04-18 14:04:26
8楼2018-01-23 15:48:58