| 查看: 3620 | 回复: 7 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
请教一下原核生物基因串联表达的问题 已有5人参与
|
|||
| 我想以多顺反子的形式在大肠杆菌里用质粒共表达两个基因，然而第一个基因正常表达，第二个基因却表达不出来（蛋白胶上没带）。我设计时在两个基因中间加了20个bp的间隔区，其中7~12bp的位置是一段SD序列。请问问题出在哪里呢？是间隔区太短还是出了移码的问题？ |
回复此楼» 猜你喜欢
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有240人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
|
质粒是普通的pet26b。第一个基因后面是一个限制酶位点，紧接着一段6bp的sd序列（和质粒上一样），后面跟第二个基因隔了一段6bp的间隔区（就是基因组中第二个基因上游6bp的片段）。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-12-15 09:19:40
2楼2016-12-14 10:43:40
ganchao1776
至尊木虫 (职业作家)
- MolEPI: 12
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 11617.1
- 散金: 1811
- 红花: 30
- 帖子: 3412
- 在线: 901.4小时
- 虫号: 330935
- 注册: 2007-03-24
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
你是要两个蛋白串起来吗？如果是中间设计好连接桥就可以了，无需SD序列。如果是要两个蛋白共表达，建议你用pETDuet载体试试，该载体有两个多克隆位点 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-12-15 09:48:23
5楼2016-12-26 19:51:06