24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3385  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

雷阵雨YZX

新虫 (初入文坛)

[交流] 请教一下原核生物基因串联表达的问题 已有5人参与

我想以多顺反子的形式在大肠杆菌里用质粒共表达两个基因,然而第一个基因正常表达,第二个基因却表达不出来(蛋白胶上没带)。我设计时在两个基因中间加了20个bp的间隔区,其中7~12bp的位置是一段SD序列。请问问题出在哪里呢?是间隔区太短还是出了移码的问题?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wshyxd

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
为什么要加间隔序列呢
5楼2016-12-26 19:51:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

13424058101

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你间隔区的序列是怎么设计的?用的是什么表达质粒
2楼2016-12-14 10:43:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雷阵雨YZX

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 13424058101 at 2016-12-14 10:43:40
你间隔区的序列是怎么设计的?用的是什么表达质粒

质粒是普通的pet26b。第一个基因后面是一个限制酶位点,紧接着一段6bp的sd序列(和质粒上一样),后面跟第二个基因隔了一段6bp的间隔区(就是基因组中第二个基因上游6bp的片段)。

发自小木虫Android客户端
3楼2016-12-15 09:19:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你是要两个蛋白串起来吗?如果是中间设计好连接桥就可以了,无需SD序列。如果是要两个蛋白共表达,建议你用pETDuet载体试试,该载体有两个多克隆位点

发自小木虫Android客户端
4楼2016-12-15 09:48:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 266分,求材料相关专业调剂 +7 哇呼哼呼哼 2026-03-30 9/450 2026-03-31 08:52 by sunshine0013
[考研] 08工科求调剂286 +5 tgs_001 2026-03-28 5/250 2026-03-31 08:18 by 一只好果子?
[考研] 083000环境科学与工程调剂,总分281 +4 橙子(胜意) 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工(085600)296求调剂 +25 稻妻小编 2026-03-26 25/1250 2026-03-30 20:11 by 滴滴上岸呀
[考研] 0703一志愿9,初试成绩:338,四六级已过,有科研经历,求调剂! +7 Zuhui0306 2026-03-25 7/350 2026-03-30 19:01 by 源_2020
[考研] 材料专硕 085600求调剂 +7 BBQ233 2026-03-30 7/350 2026-03-30 17:44 by oooqiao
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +6 王一一依依 2026-03-30 8/400 2026-03-30 11:52 by yjolah
[考研] 318一志愿吉林大学生物与医药 求调剂 +5 笃行致远. 2026-03-28 5/250 2026-03-30 06:56 by ilovexiaobin
[考研] 调剂310 +12 温柔的晚安 2026-03-25 13/650 2026-03-29 20:01 by 无际的草原
[考研] 321求调剂 +7 璞玉~~ 2026-03-25 8/400 2026-03-29 06:41 by 544594351
[考研] 071000生物学求调剂,初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 +6 芦lty 2026-03-25 7/350 2026-03-28 13:13 by 唐沐儿
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 086502化学工程342求调剂 +6 阿姨复古不过 2026-03-27 6/300 2026-03-28 07:06 by wangy0907
[考研] 331环境科学与工程求调剂 +3 熠然好运气 2026-03-27 3/150 2026-03-28 04:11 by fmesaito
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 085600,材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
信息提示
请填处理意见