| 查看: 3392 | 回复: 7 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
请教一下原核生物基因串联表达的问题 已有5人参与
|
|||
| 我想以多顺反子的形式在大肠杆菌里用质粒共表达两个基因，然而第一个基因正常表达，第二个基因却表达不出来（蛋白胶上没带）。我设计时在两个基因中间加了20个bp的间隔区，其中7~12bp的位置是一段SD序列。请问问题出在哪里呢？是间隔区太短还是出了移码的问题？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有159人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有6人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
wangsongwei
木虫 (小有名气)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 3393.1
- 散金: 40
- 帖子: 212
- 在线: 194.6小时
- 虫号: 1511930
- 注册: 2011-11-27
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
7楼2017-04-18 14:04:26
2楼2016-12-14 10:43:40
|
质粒是普通的pet26b。第一个基因后面是一个限制酶位点，紧接着一段6bp的sd序列（和质粒上一样），后面跟第二个基因隔了一段6bp的间隔区（就是基因组中第二个基因上游6bp的片段）。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-12-15 09:19:40
ganchao1776
至尊木虫 (职业作家)
- MolEPI: 12
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 11613.1
- 散金: 1811
- 红花: 30
- 帖子: 3402
- 在线: 900.8小时
- 虫号: 330935
- 注册: 2007-03-24
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
你是要两个蛋白串起来吗？如果是中间设计好连接桥就可以了，无需SD序列。如果是要两个蛋白共表达，建议你用pETDuet载体试试，该载体有两个多克隆位点 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-12-15 09:48:23
