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蒲蒲198312

银虫 (正式写手)

[求助] 急!请教蛋白电泳为何跑成这样? 已有3人参与

请教专业人士或经常做蛋白电泳的朋友,如果跑出来的蛋白电泳条带如图中间三条模样(两端两条为marker),一般有哪些原因原因?是样品本身问题(例如纯度不够?蛋白溶液浓度问题?)还是配胶等技术问题?请指教,菜鸟一枚在此谢过~

急!请教蛋白电泳为何跑成这样?


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helpwater

新虫 (小有名气)

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-12-03 22:31:35
看你的Marker没问题,感觉制胶没什么问题。但是,你的条带拖尾严重。你可以看看,是不是以下的问题。1,样品浓度过高,需要上样前稀释下。2,样品纯度不够,需要再纯化。3,样品没有跑下去,可能是你的下层胶Ph值等于或者低于跟你的蛋白质等电点相关。也可能是你下层胶浓度过高。不知道说的对不对。个人经验粗浅。

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

7楼2016-12-03 00:36:58
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寂寞之巅

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-03 22:31:54
你的MARKER 跑出来的条带还比较整齐 说明 胶的问题不大  应该是你样品本身的问题
好好学习,天天向上
2楼2016-12-02 08:26:22
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Ailee桑卡娜

新虫 (小有名气)

电压降低点跑,另外最好点样隔开,带都挤压了

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5楼2016-12-02 11:37:04
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太子参

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-03 22:32:11
上样前可以离心纯化一下样品,配胶的浓度要更加蛋白质的分子量大小来选择,还有就是上样量也很关键,值得注意
8楼2016-12-03 11:23:26
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田生帅菜

新虫 (正式写手)

9楼2016-12-03 15:42:31
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一个不小心就

金虫 (正式写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 蒲蒲198312 at 2016-12-03 18:31:43
样品是从皮中提取的蛋白,透析冻干后溶解在缓冲液中做的电泳,浓度1mg/ml,上样量大概20微克。
...

感觉是样品处理过程中的问题。验证一些就知道了,直接拿皮加点Loading煮一下,跑SDS,跑的正常的话就是处理样品过程中产生的问题了。
15楼2016-12-03 22:22:13
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普通回帖

star013

新虫 (知名作家)


我们可以做蛋白电泳技术服务

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3楼2016-12-02 08:27:11
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蒲蒲198312

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 寂寞之巅 at 2016-12-02 08:26:22
你的MARKER 跑出来的条带还比较整齐 说明 胶的问题不大  应该是你样品本身的问题

请问样品本身什么问题?

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4楼2016-12-02 08:47:13
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一个不小心就

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
什么样品,怎么处理的,关键信息要给出来
6楼2016-12-02 23:46:41
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13132551195

新虫 (小有名气)

你的胶放了几天了,是不是放了时间长了。时间长了会有胶和板之间有空隙的情况

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10楼2016-12-03 16:15:46
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