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xzfihjj

新虫 (小有名气)


[交流] 离子交换层析蛋白

我要分离的蛋白活性对比后最佳pH为7,但是我不知道它等电点,我现在阴阳离子交换都要试一下,用什么离子交换剂?流动相tris-HCl的pH用多强的呢?NaCl浓度剃度怎么增加呢? 保研了导师要我做实验,还换了专业,现在有点蒙圈。求各位大神指点迷津,谢谢!!

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earth

木虫 (小有名气)



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1.蛋白不是带his标签,GST标签或其他什么标签的?
2.实验室有现成的离子交换的树脂?
3. 实验室有纯化仪(或者梯度混合器)?这个用来控制盐梯度。

buffer A :缓冲液一般20-50mM,缓冲液组成和pH值根据实际情况。
buffer B: buffer A +1MNaCl
13楼2016-11-28 14:27:14
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xzfihjj

新虫 (小有名气)


引用回帖:
13楼: Originally posted by earth at 2016-11-28 14:27:14
1.蛋白不是带his标签,GST标签或其他什么标签的?
2.实验室有现成的离子交换的树脂?
3. 实验室有纯化仪(或者梯度混合器)?这个用来控制盐梯度。

buffer A :缓冲液一般20-50mM,缓冲液组成和pH值根据实际情 ...

蛋白是纯未知蛋白,我查了下用纤维素离子交换剂分离蛋白质比较好,所以想用下。

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14楼2016-11-28 22:04:35
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earth

木虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
14楼: Originally posted by xzfihjj at 2016-11-28 22:04:35
蛋白是纯未知蛋白,我查了下用纤维素离子交换剂分离蛋白质比较好,所以想用下。
...

那就买填料试试吧。
15楼2016-11-29 07:14:01
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dsctg2楼
2016-11-23 21:36   回复  
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2016-11-23 21:53   回复  
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h 发自小木虫Android客户端
2016-11-28 10:57   回复  
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