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xzfihjj

新虫 (小有名气)

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[交流] 离子交换层析蛋白

我要分离的蛋白活性对比后最佳pH为7，但是我不知道它等电点，我现在阴阳离子交换都要试一下，用什么离子交换剂？流动相tris-HCl的pH用多强的呢？NaCl浓度剃度怎么增加呢？保研了导师要我做实验，还换了专业，现在有点蒙圈。求各位大神指点迷津，谢谢！！

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1楼 2016-11-23 21:35:51

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earth

木虫 (小有名气)

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1.蛋白不是带his标签，GST标签或其他什么标签的？
2.实验室有现成的离子交换的树脂？
3. 实验室有纯化仪（或者梯度混合器）？这个用来控制盐梯度。

buffer A ：缓冲液一般20-50mM，缓冲液组成和pH值根据实际情况。
buffer B： buffer A +1MNaCl

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13楼2016-11-28 14:27:14

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xzfihjj

新虫 (小有名气)

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引用回帖:

13楼: Originally posted by earth at 2016-11-28 14:27:14
1.蛋白不是带his标签，GST标签或其他什么标签的？
2.实验室有现成的离子交换的树脂？
3. 实验室有纯化仪（或者梯度混合器）？这个用来控制盐梯度。

buffer A ：缓冲液一般20-50mM，缓冲液组成和pH值根据实际情 ...

蛋白是纯未知蛋白，我查了下用纤维素离子交换剂分离蛋白质比较好，所以想用下。

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14楼2016-11-28 22:04:35

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