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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 离子交换层析蛋白
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xzfihjj

新虫 (小有名气)

[交流] 离子交换层析蛋白

我要分离的蛋白活性对比后最佳pH为7，但是我不知道它等电点，我现在阴阳离子交换都要试一下，用什么离子交换剂？流动相tris-HCl的pH用多强的呢？NaCl浓度剃度怎么增加呢？ 保研了导师要我做实验，还换了专业，现在有点蒙圈。求各位大神指点迷津，谢谢！！

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1楼 2016-11-23 21:35:51
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earth

木虫 (小有名气)
★
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1.蛋白不是带his标签，GST标签或其他什么标签的？
2.实验室有现成的离子交换的树脂？
3. 实验室有纯化仪（或者梯度混合器）？这个用来控制盐梯度。

buffer A ：缓冲液一般20-50mM，缓冲液组成和pH值根据实际情况。
buffer B： buffer A +1MNaCl
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13楼2016-11-28 14:27:14
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xzfihjj

新虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by earth at 2016-11-28 14:27:14
1.蛋白不是带his标签，GST标签或其他什么标签的？
2.实验室有现成的离子交换的树脂？
3. 实验室有纯化仪（或者梯度混合器）？这个用来控制盐梯度。

buffer A ：缓冲液一般20-50mM，缓冲液组成和pH值根据实际情 ...

蛋白是纯未知蛋白，我查了下用纤维素离子交换剂分离蛋白质比较好，所以想用下。

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14楼2016-11-28 22:04:35
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earth

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
14楼: Originally posted by xzfihjj at 2016-11-28 22:04:35
蛋白是纯未知蛋白，我查了下用纤维素离子交换剂分离蛋白质比较好，所以想用下。
...

那就买填料试试吧。
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15楼2016-11-29 07:14:01
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dsctg2楼
2016-11-23 21:36   回复  
xzfihjj(金币+2): 谢谢参与
dsctg3楼
2016-11-23 21:36   回复  
xzfihjj(金币+2): 谢谢参与
dsctg4楼
2016-11-23 21:36   回复  
xzfihjj(金币+2): 谢谢参与
dsctg5楼
2016-11-23 21:36   回复  
xzfihjj(金币+2): 谢谢参与
dsctg6楼
2016-11-23 21:37   回复  
xzfihjj(金币+2): 谢谢参与
令那青山也变7楼
2016-11-23 21:53   回复  
xzfihjj(金币+2): 谢谢参与
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令那青山也变8楼
2016-11-23 21:53   回复  
xzfihjj(金币+2): 谢谢参与
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令那青山也变9楼
2016-11-23 21:53   回复  
xzfihjj(金币+2): 谢谢参与
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令那青山也变10楼
2016-11-23 21:53   回复  
xzfihjj(金币+2): 谢谢参与
u 发自小木虫Android客户端
令那青山也变11楼
2016-11-23 21:53   回复  
xzfihjj(金币+2): 谢谢参与
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也许太固执12楼
2016-11-28 10:57   回复  
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