24小时热门版块排行榜    

查看: 3590  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

声线青鸟

新虫 (小有名气)

[交流] 同源臂一直p不出来

最近想删除一个基因,但是,目的基因的上下游同源臂一直p不出来,没有条带。10ul体系有条带,扩增50ul就没有了,为什么呢?在下刚接触分子生物,求各位大神给点建议~

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

声线青鸟

新虫 (小有名气)

现在只有基因片段下游同源臂有,上游的一直p不出来,各位大神有遇见过这种情况么?

发自小木虫IOS客户端
9楼2016-12-15 14:03:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

黄小萌萌

银虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
优化条件,或者换引物
2楼2016-12-09 20:13:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

迷路人啊

新虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
做个温梯,不行的话就换引物,反正是同源臂长一点无所谓
3楼2016-12-10 12:07:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
同源臂的大小是多少呢,10微升扩增效果好么?下次pcr的时候,可以做一管10微的为对照,如果10μ可以,50μ不行,那估计是体系大pcr效果不好,你可以都分装成10μ进行扩增。如果都不行,多半是基因组模板降解等原因。如果10μ特异性不好,估计就是引物特异性问题,可以优化pcr条件,或者换引物,祝好!

发自小木虫Android客户端
天空才是极限,我有信心飞的更高!
4楼2016-12-10 21:47:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见