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同源臂一直p不出来
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最近想删除一个基因,但是,目的基因的上下游同源臂一直p不出来,没有条带。10ul体系有条带,扩增50ul就没有了,为什么呢?在下刚接触分子生物,求各位大神给点建议~ 发自小木虫IOS客户端 |
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同源臂的大小是多少呢,10微升扩增效果好么?下次pcr的时候,可以做一管10微的为对照,如果10μ可以,50μ不行,那估计是体系大pcr效果不好,你可以都分装成10μ进行扩增。如果都不行,多半是基因组模板降解等原因。如果10μ特异性不好,估计就是引物特异性问题,可以优化pcr条件,或者换引物,祝好! 发自小木虫Android客户端 |

4楼2016-12-10 21:47:48
5楼2016-12-12 13:01:29
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8楼2016-12-15 14:02:26
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