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FunChansu

新虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切给切没了是怎么回事? 已有3人参与

1是trans 2k plus II, 2和3 是我酶切之后的体系,4是trans 8k。2里是完全切成了一片模糊,3是基本一片模糊,中间亮一点的看大小是我想要的条带。最神奇的是6k的质粒居然基本上切没了。质粒本身没问题,我今天又重新跑了一下质粒,而且拿这个质粒做模板跑过PCR,序列应该也没有问题。
体系:1微克pet28a   3 ul 10x k buffer   1 ul ncoI   1ul  xho1   加水配成30ul。
时间:2.5 h
突然发现实验室里有BSA,是因为没加BSA吗?

双酶切给切没了是怎么回事?
yiqi 2016-11-15 22hr 25min.jpg
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star013

新虫 (知名作家)


4楼2016-11-17 08:28:17
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查看全部 5 个回答

781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
FunChansu: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2016-11-17 20:06:09
楼主下次把酶切的和没酶切的放上去比较下,BSA是内切酶的保护剂。
采菊东篱下,悠然见南山。
2楼2016-11-17 07:54:47
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
下次把不酶切的质粒也点上去
3楼2016-11-17 08:26:07
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我师弟也遇到这样的情况,切了两次,都这样,然后我让他再重新提质粒试一次,看看行不行
···
5楼2016-11-17 09:27:25
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