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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 双酶切给切没了是怎么回事？
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FunChansu

新虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切给切没了是怎么回事？ 已有3人参与

1是trans 2k plus II， 2和3 是我酶切之后的体系，4是trans 8k。2里是完全切成了一片模糊，3是基本一片模糊，中间亮一点的看大小是我想要的条带。最神奇的是6k的质粒居然基本上切没了。质粒本身没问题，我今天又重新跑了一下质粒，而且拿这个质粒做模板跑过PCR，序列应该也没有问题。
体系：1微克pet28a   3 ul 10x k buffer   1 ul ncoI   1ul  xho1   加水配成30ul。
时间：2.5 h
突然发现实验室里有BSA，是因为没加BSA吗？

双酶切给切没了是怎么回事？
yiqi 2016-11-15 22hr 25min.jpg
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1楼 2016-11-16 23:08:29
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我师弟也遇到这样的情况，切了两次，都这样，然后我让他再重新提质粒试一次，看看行不行
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···
5楼2016-11-17 09:27:25
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
FunChansu: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2016-11-17 20:06:09
楼主下次把酶切的和没酶切的放上去比较下，BSA是内切酶的保护剂。
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采菊东篱下，悠然见南山。
2楼2016-11-17 07:54:47
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
下次把不酶切的质粒也点上去
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3楼2016-11-17 08:26:07
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star013

新虫 (知名作家)
没切好

发自小木虫Android客户端
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4楼2016-11-17 08:28:17
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