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lishuaiguang

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩增基因组DNA其中606 bp序列一直失败 已有3人参与

用基因组提取试剂盒提取了细胞的基因组DNA,电泳检测大于15000 bp处有单一亮条带,想扩增基因组其中一段序列,根据Genbank上的基因组序列设计了一套引物,上游引物跨内含子和外显子,下游引物在内含子中,产物大小为606 bp,扩了两次,换了两种高保真酶,都没有扩出来,电泳检测什么条带都没有。有没有大神给出建议,谢谢了!

@wizardfan 发自小木虫Android客户端
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lishuaiguang

新虫 (初入文坛)

2楼2016-11-16 10:28:21
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
完全没有条带吗?那可能是你的引物问题
···
3楼2016-11-16 22:12:04
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star013

新虫 (知名作家)


4楼2016-11-17 08:31:11
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lishuaiguang

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小冀- at 2016-11-16 22:12:04
完全没有条带吗?那可能是你的引物问题

完全没有条带的,引物的设计就是根据一般的原则来设计的,这样的不合理的话,该怎么设计呢?

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5楼2016-11-17 09:08:09
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lishuaiguang

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by star013 at 2016-11-17 08:31:11
引物设计不合理吧

引物的设计就是根据基因组序列来设计的,符合一般的原则

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6楼2016-11-17 09:09:37
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鱼》

新虫 (正式写手)

温度有做梯度吗,模板换一下试试

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7楼2016-11-19 23:45:23
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八戒不戒

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

8楼2016-11-20 02:44:00
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熊喵大侠

新虫 (正式写手)

9楼2016-11-20 03:43:29
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sunshinelQQ

新虫 (初入文坛)

我的也是,基因就是扩不出来,请问你现在扩的怎么样了,用什么方法扩出来的,麻烦指导指导吧

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10楼2017-03-02 23:14:19
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