24小时热门版块排行榜    

查看: 3695  |  回复: 31

dahai0806702

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
25楼: Originally posted by David_王 at 2016-12-12 18:57:25
谢谢大家的建议和帮助。问题已经解决了。好久了,现在想起来总结一下。我重新overlap扩增了片段,回收回来浓度比以前高了,并且加A尾的过程延长到了30min,换了新的T载体(之前的时间可能有点久,效率比较低,现在回 ...

请问一下  后来换了什么载体
我现在与遇到类似的问题了,pcr  P出来了  转化连接这块老出问题,有时转化到DH5α涂板就不长菌,有的时候长菌但是测序发现不对

请教各位大神给些建议和帮助
31楼2017-06-12 16:19:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

涯天一方

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 18721317208 at 2016-11-14 21:26:33
1.先加a尾,再胶回收,考虑到高保真酶的作用,建议头天做pcr,隔天加a。2.连接温度可以调整为22度过夜试试。3.一定要蓝白斑筛选,3000片段连接效率会非常低。正常情况就算提出质粒为空载,电泳检测应该也会在3000左 ...

我也遇到了质粒大小比实际小的问题,我想问是,我做完酶切后只切出一条带,理论是两条带才对,即使测序正确,回头做胶回收时用酶切还是直切一个条带呀
32楼2017-07-07 00:34:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 David_王 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 高分子化学与物理调剂 +4 好好好1233 2026-02-28 8/400 2026-03-01 09:26 by 好好好1233
[考研] 290求调剂 +6 材料专硕调剂; 2026-02-28 7/350 2026-03-01 09:21 by L135790
[考研] 272求调剂 +4 材紫有化 2026-02-28 4/200 2026-03-01 09:20 by L135790
[考研] 291分工科求调剂 +5 science饿饿 2026-03-01 5/250 2026-03-01 09:19 by L135790
[考研] 0856求调剂285 +5 吕仔龙 2026-02-28 5/250 2026-03-01 09:18 by L135790
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 284求调剂 +5 天下熯 2026-02-28 5/250 2026-03-01 08:49 by ms629
[考研] 材料类求调剂 +7 wana_kiko 2026-02-28 7/350 2026-03-01 07:55 by ms629
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 272求调剂 +4 田智友 2026-02-28 4/200 2026-03-01 06:43 by 刘兵
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考博] 博士自荐 +3 kkluvs 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:59 by StarAura
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见