24小时热门版块排行榜    

查看: 2260  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

一起来旅行

银虫 (正式写手)

[求助] PCR扩增结果有9个突变位点 已有3人参与

我用的是地方猪的背最长肌的cDNA为模板,2?Taq MasterMix来扩增的CDS区,目的片段1121bp,再连t载体最后菌液pcr后去测序,结果与ncbi上的原始序列比对后,发现了9个突变位点,是不是有点多啊?

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aliaaxmu2016

金虫 (职业作家)

建议重新设计引物再测一次,我这边测长片段都是分成好几段测的,避免把某个前段放在边缘测不准

发自小木虫Android客户端
8楼2016-11-11 08:01:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

一起来旅行

银虫 (正式写手)

对了,测序结果的峰也是单峰

发自小木虫Android客户端
2楼2016-11-09 17:49:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aliaaxmu2016

金虫 (职业作家)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-11 07:16:31
要看原始测序图AB1文件,就算他给你判读为txt文件了,你也要看,假如在两端有突变是不准确的,你要重新设计引物重新测那一段(末端)

发自小木虫Android客户端
3楼2016-11-09 17:59:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuhan131481

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-11-11 07:16:47
1. 用2×Q5PCRmix或者KAPA HIFI PCRmix扩下试试,这两种酶的保真性是taq酶的100倍。
2. 把DNA序列翻译成氨基酸序列,比对下氨基酸序列,看看是不是同义突变。
3. 确定地方猪与文献的来源一样吗,会不会本来基因就有一定的差异,只不过该基因代表的蛋白功能是相似的。就是蛋白结构域是保守的,功能一样,基因序列有细微差别。
4楼2016-11-09 18:06:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 GpvwGNVshCOp 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:39 by thgx1vqMqrLw
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +10 yufeiwaner 2026-08-09 11/550 2026-08-10 18:47 by yufeiwaner
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
信息提示
请填处理意见