24小时热门版块排行榜    

查看: 2258  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

一起来旅行

银虫 (正式写手)

[求助] PCR扩增结果有9个突变位点 已有3人参与

我用的是地方猪的背最长肌的cDNA为模板,2?Taq MasterMix来扩增的CDS区,目的片段1121bp,再连t载体最后菌液pcr后去测序,结果与ncbi上的原始序列比对后,发现了9个突变位点,是不是有点多啊?

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aliaaxmu2016

金虫 (职业作家)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-11 07:16:31
要看原始测序图AB1文件,就算他给你判读为txt文件了,你也要看,假如在两端有突变是不准确的,你要重新设计引物重新测那一段(末端)

发自小木虫Android客户端
3楼2016-11-09 17:59:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

一起来旅行

银虫 (正式写手)

对了,测序结果的峰也是单峰

发自小木虫Android客户端
2楼2016-11-09 17:49:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuhan131481

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-11-11 07:16:47
1. 用2×Q5PCRmix或者KAPA HIFI PCRmix扩下试试,这两种酶的保真性是taq酶的100倍。
2. 把DNA序列翻译成氨基酸序列,比对下氨基酸序列,看看是不是同义突变。
3. 确定地方猪与文献的来源一样吗,会不会本来基因就有一定的差异,只不过该基因代表的蛋白功能是相似的。就是蛋白结构域是保守的,功能一样,基因序列有细微差别。
4楼2016-11-09 18:06:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一起来旅行

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yuhan131481 at 2016-11-09 18:06:03
1. 用2×Q5PCRmix或者KAPA HIFI PCRmix扩下试试,这两种酶的保真性是taq酶的100倍。
2. 把DNA序列翻译成氨基酸序列,比对下氨基酸序列,看看是不是同义突变。
3. 确定地方猪与文献的来源一样吗,会不会本来基因就 ...

有五个为错意突变,还是有点多啊

发自小木虫Android客户端
5楼2016-11-09 19:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 yPv6ndDtiRxQ 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:15 by CLKTSgjM0Uqj
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +7 Tide man 2026-08-10 8/400 2026-08-11 15:49 by 铁帽子农民
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 帮忙看看fileCode +6 wwncly 2026-08-10 12/600 2026-08-11 13:01 by wwncly
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +10 yufeiwaner 2026-08-09 11/550 2026-08-10 18:47 by yufeiwaner
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
信息提示
请填处理意见