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chase1024木虫 (小有名气)
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PCR扩增基因酶切位点丢失 已有2人参与
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| 目的基因2600bp（无酶切位点）已连接至T载，上游引物59bp（带有酶切位点和RBS序列），下游引物30bp（带有酶切位点），扩增目的基因连接pMD19(simple)，转化，菌落PCR验证，挑取阳性转化子送测序，测序结果显示只有目的基因（ATG开始，TAA结束），酶切位点均缺失，提取质粒酶切验证也不行，请问各位大神这是什么原因导致的？感激不尽。。。 |
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