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菌液PCR用M13扩增不出来
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昺昺
木虫
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虫号: 1387297
注册: 2011-09-02
专业: 植物生理与生化
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]
菌液PCR用M13扩增不出来
已有4人参与
用引物A扩增出600bp的片段想测序,转化后用M13做菌液PCR没有条带,用引物A做有600bp条带,送去用M13测序没有成功,现在又用引物A重新送去测序,结果暂时还没有回来。这个T载体原先一直用,没有问题。
想请教各位大牛遇到过这种情况没?该如何解决?
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目的基因与载体连接后菌液PCR检测引物用什么
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太阳出来,星星要走。
1楼
2016-10-18 13:32:54
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lemonvivi
新虫
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帖子: 251
在线: 67.2小时
虫号: 4170045
注册: 2015-10-24
性别:
MM
专业: 生物大分子结构与功能
可能是假阳性
发自小木虫Android客户端
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7楼
2016-10-20 20:41:32
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fanfan9056
银虫
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帖子: 65
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虫号: 4492388
注册: 2016-03-11
专业: 环境微生物学
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流
2016-10-20 08:56:00
你确定您的片段转进去了?M13检测没有条带,说明克隆是空载体,没有转进去。
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2楼
2016-10-19 10:45:08
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金虫
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帖子: 605
在线: 58.9小时
虫号: 4513880
注册: 2016-03-17
性别: GG
专业: 动物遗传学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
昺昺: 金币+3,
★
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2016-10-20 07:50:07
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流
2016-10-20 08:59:57
应该是没连接进去,重新做一下试试。下次连接时间可以长一点,一般连19T都是M13引物测序
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生活活生生累死
3楼
2016-10-19 11:15:30
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ouzhiying
木虫
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帖子: 3776
在线: 366.5小时
虫号: 200827
注册: 2006-02-27
性别: GG
专业: 病原微生物变异与耐药
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
昺昺: 金币+3,
★
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2016-10-20 07:50:21
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流
2016-10-20 09:01:45
实验失败,重新开始
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4楼
2016-10-19 11:21:35
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