应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 菌液PCR用M13扩增不出来
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
111/2返回列表12下一页
查看: 2345  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

昺昺

木虫 (小有名气)

[求助] 菌液PCR用M13扩增不出来 已有4人参与

用引物A扩增出600bp的片段想测序，转化后用M13做菌液PCR没有条带，用引物A做有600bp条带，送去用M13测序没有成功，现在又用引物A重新送去测序，结果暂时还没有回来。这个T载体原先一直用，没有问题。
    想请教各位大牛遇到过这种情况没？该如何解决？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
太阳出来，星星要走。
1楼 2016-10-18 13:32:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ouzhiying

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
昺昺: 金币+3, ★有帮助 2016-10-20 07:50:21
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-20 09:01:45
实验失败，重新开始
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2016-10-19 11:21:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

fanfan9056

银虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-20 08:56:00
你确定您的片段转进去了？M13检测没有条带，说明克隆是空载体，没有转进去。
赞一下 回复此楼
2楼2016-10-19 10:45:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bio转录组

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
昺昺: 金币+3, ★有帮助 2016-10-20 07:50:07
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-20 08:59:57
应该是没连接进去，重新做一下试试。下次连接时间可以长一点，一般连19T都是M13引物测序
赞一下 回复此楼
生活活生生累死
3楼2016-10-19 11:15:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦想天行

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
昺昺: 金币+3, ★有帮助 2016-10-20 07:50:27
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-20 09:04:09
没连接进去，重新做一下试试。下次连接酶多点，时间可以长一点。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-10-19 19:37:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

昺昺

木虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-20 09:04:15
引用回帖:
3楼: Originally posted by bio转录组 at 2016-10-19 11:15:30
应该是没连接进去，重新做一下试试。下次连接时间可以长一点，一般连19T都是M13引物测序

没连接进去似乎是最合理的解释。但是我还有个疑问，没连接进去，目的片段也会随着菌落存在吗？我做了10个转化，总共挑了96个单菌落，用目的片段的引物扩增，有94个单菌落扩增出了目的条带。
赞一下 回复此楼
太阳出来，星星要走。
6楼2016-10-20 07:53:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lemonvivi

新虫 (小有名气)
可能是假阳性

发自小木虫Android客户端
回复此楼
7楼2016-10-20 20:41:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

饺子弟

铜虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-22 21:59:54
菌液电泳的加入的模版量和酶的选择也是影响因素，可以考虑一下，希望不是假阳性。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-10-21 22:33:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

饺子弟

铜虫 (小有名气)
菌落PCR刚才发错了

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
9楼2016-10-21 22:35:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flhua

木虫 (正式写手)

bachelordom
蓝白版筛选就行 挑白斑

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
只要有梦想，坚持就一定能实现
10楼2016-10-22 13:00:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 昺昺 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿0817化学工程与技术，求调剂 +7 我不是只因 2026-04-02 8/400 2026-04-03 00:15 by 雨天撑伞
[考研] 0710生物学336分求调剂 +3 kiyy 2026-04-01 3/150 2026-04-02 10:54 by w虫虫123
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 09:52 by yulian1987
[考研] 0710生物学，325求调剂 +3 mkkkkkl 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:48 by Jaylen.
[考研] 各位老师好，我的一志愿为北京科技大学085601材料专硕 +13 Koxui 2026-03-28 13/650 2026-04-02 09:35 by 哒哒哒呱呱呱
[考研] 考研调剂 +12 Amber00 2026-03-31 12/600 2026-04-02 09:04 by sanrepian
[考研] 332求调剂 +8 Lyy930824@ 2026-03-29 8/400 2026-04-01 18:40 by 千钧澄玉宇啊
[考研] 0856，材料与化工321分求调剂 +13 大馋小子 2026-03-27 14/700 2026-04-01 15:58 by yanflower7133
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-03-31 11/550 2026-04-01 11:35 by wangjy2002
[考研] 070300求调剂306分 +5 26要上岸 2026-03-27 5/250 2026-04-01 11:09 by oooqiao
[考研] 生物学296求调剂 +10 汤圆包 2026-03-29 14/700 2026-04-01 10:44 by 求调剂zz
[考研] 326求调剂 +4 崽崽仔 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:58 by 我的船我的海
[考研] 土木304求调剂 +3 兔突突突， 2026-03-31 3/150 2026-04-01 09:42 by JourneyLucky
[考研] 343求调剂 +8 爱羁绊 2026-03-28 8/400 2026-03-31 16:12 by 不吃魚的貓
[考研] 353求调剂 +3 江上枫_26 2026-03-28 3/150 2026-03-31 15:53 by jp9609
[考研] 286求调剂 +5 丢掉懒惰 2026-03-27 8/400 2026-03-31 11:27 by Delta2012
[考研] 一志愿中海洋320化学工程与技术学硕求调剂 +8 披星河 2026-03-30 8/400 2026-03-31 08:53 by lbsjt
[考研] 抱歉 +4 田洪有 2026-03-30 4/200 2026-03-30 21:26 by mumin1990
[考研] 085600，专业课化工原理，321分求调剂 +5 大馋小子 2026-03-28 5/250 2026-03-29 08:56 by qingfeng258
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭