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关于rt-qpcr的数据处理求助 已有1人参与
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被老师分配的是肿瘤组织里提取的cDNA和正常人组织里提取的cDNA表达量差异 用的是SYBR Ⅱ，每次3个复孔，每个样本三次重复。现有12个正常人样本，11个肿瘤组织样本。 使用2-ΔΔCt的方法进行分析。 想问的问题是：1.ΔΔCt=ΔCt（患者）-ΔCt（正常人对照）中，ΔCt（正常人对照）是什么？是把所有正常人样本的ΔCt（正常人对照）分别计算，再进行平均么？ 2.不同正常人样本的ΔCt的差异比较大，是因为个体差异么？对于差异特别大的，应不应该进行取舍？如果需要，差异大到什么程度需要取舍呢？ 3.有两个肿瘤组织样本的所有基因，不论查到的资料里说是上调还是下调，用同样方法计算出的2-ΔΔCt值远小于1，而其他样本的结果基本都符合查到的资料。但奇怪的是它们的曲线看起来都很正常。这个应该怎么解释呢？ 英文阅读能力不太强又被老师赶着逼着学会数据处理。。感觉好崩溃=皿=万能的虫友们求帮忙。平时只看帖不怎么签到回帖的只有这么多金币，求不嫌弃 |
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3楼2016-10-14 00:21:31
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