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华西Aspirin

新虫 (初入文坛)

[交流] 双酶切分子克隆的分子过程 已有7人参与

引物上含酶切序列,但是PCR产物不是有一部分只含有一条合成的引物吗?这样不是只有其中一条链含有一种酶切序列?怎么双酶切法。。我的分子生物学方面学的很差不是很理解。印象中双酶切是两种酶同时切割目的片段和载体,按照PCR过程有一条模板链一条合成链,只有合成链才有引物才有酶切序列呀,虽然会有一部分合成链会成为模板,但还是有很多pcr产物是一条模板链一条合成链的吧
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DAX1

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-17 06:45:05
汗,真给这个问题给问道了,不知道怎么解释才好。内切酶是切双链,然后PCR产物也是双链啊,我们一般用的会识别回文结构二类酶

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2016-09-16 16:52:10
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juzhixianwei

铜虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-17 06:44:59
因为起始的模板量很低,所以PCR产物主要还是合成链,合成链是双链DNA,两头分别是两段引物,所以含有引物上的酶切序列

发自小木虫Android客户端
2楼2016-09-16 16:51:47
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010308Jing

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
正向引物引入一个酶切位点,反向引物引入另外一个酶切位点,正好就是双酶切了

发自小木虫Android客户端
4楼2016-09-17 12:52:08
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luckydog52

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
Pcr原理有待提高啊

发自小木虫Android客户端
自信源于一次次成功的积累
5楼2016-09-17 21:24:44
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