| 查看: 1830 | 回复: 1 | ||
[求助]
pe194质粒中温敏复制子的克隆与基因敲除用穿梭质粒的构建问题
|
|
文献报道芽孢杆菌用质粒pe194中含有一个我很感兴趣的温敏复制子，可用于基因敲除用。我现在有一个穿梭质粒能够在大肠杆菌与芽孢杆菌中复制表达，但该质粒中的芽孢杆菌用复制子不符合实验要求，想替换成上述的pe194中温敏复制子。 本人没有pe194，目前从另一个质粒中已获得该温敏复制子的全长片段，约1.3kb左右，双酶切验证已正向插入到我自己的穿梭质粒中。 我的这个构建好的穿梭质粒拥有大肠杆菌用氨苄抗性和芽孢杆菌用卡那抗性，两个抗性基因均能在大肠杆菌中表达。但电转化进入芽孢杆菌中，却没有任何转化子在28度下长出。不知道为什么？转化条件我可以自己摸索，但就担心质粒构建过程中出现问题。 有做过这方面实验的同学吗？有pe194质粒的吗？能交换吗？呵呵 本人没怎么做过分子生物学，实验室里也没有能帮忙的师兄师姐，小木虫里的虫虫们能否提供些建议，多谢。 [ Last edited by 光 on 2011-12-9 at 10:46 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有146人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有3人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 交流下自己的做的是什么类型的温敏材料吗 我做的是聚N-异丙基丙烯酰胺
已经有10人回复
- 温敏性聚合物
已经有7人回复
- 温敏性胶束
已经有16人回复
- 温敏胶束 AFM 制样 测试
已经有14人回复
- 【交流】温敏水凝胶
已经有13人回复
- 【求助】温敏型40℃形成胶束的外貌表征办法（AFM或者SEM）
已经有17人回复
- 【求助】聚乙烯己内酰胺（PVCL）在酸性条件下是否具备温敏性
已经有6人回复
- 请问温敏性高分子方面的文章在CC里投在哪一类里?
已经有11人回复
gandalf886
银虫 (小有名气)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 463.9
- 帖子: 131
- 在线: 22.9小时
- 虫号: 257022
- 注册: 2006-06-03
- 性别: GG
- 专业: 分子生物学
2楼2011-12-10 16:53:10
5