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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 跪求条带为什么不对呀
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竹在心间

银虫 (小有名气)

[求助] 跪求条带为什么不对呀 已有3人参与

本来加入的引物 p出来的应该在193bp但最后 p 出来的确在750bp有明亮条带怎么回事儿呀？

跪求条带为什么不对呀


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1楼 2016-09-05 09:12:51
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:20:48
换个引物吧。。。。。。。国防生多个他热狗
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采菊东篱下，悠然见南山。
2楼2016-09-05 10:08:28
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-05 22:37:36
非特异扩增，好像你自己的目标带扩增的也不好吧，确定模板、体系、程序没问题的话就换引物吧。
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3楼2016-09-05 13:19:05
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竹在心间

银虫 (小有名气)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:21:02
引用回帖:
3楼: Originally posted by stone2239 at 2016-09-05 13:19:05
非特异扩增，好像你自己的目标带扩增的也不好吧，确定模板、体系、程序没问题的话就换引物吧。

您好…我怎么才能知道模板有没有问题…测rna还是不错的感觉这是我的rna
跪求条带为什么不对呀-1



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4楼2016-09-05 16:45:49
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010308Jing

木虫 (正式写手)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:21:10
给模板测序试试

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5楼2016-09-05 19:02:47
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更恋秋风

铁杆木虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:21:16
做的RT-PCR?你可以用你的要pcr的基因做一个对照，看看194有没有条带，如果没有，那你就用你的基因作为模板，优化一下条件，主要是退火温度

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6楼2016-09-05 19:05:43
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竹在心间

银虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:21:22
引用回帖:
6楼: Originally posted by 更恋秋风 at 2016-09-05 19:05:43
做的RT-PCR?你可以用你的要pcr的基因做一个对照，看看194有没有条带，如果没有，那你就用你的基因作为模板，优化一下条件，主要是退火温度

是 RT- pcr但是我不明白您的意思怎么用我要的基因做对照呀？不好意思我研一刚接触分子不太懂，麻烦您给我讲下行吗？

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7楼2016-09-05 19:09:29
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更恋秋风

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-09-05 22:38:04
引用回帖:
7楼: Originally posted by 竹在心间 at 2016-09-05 19:09:29
是 RT- pcr但是我不明白您的意思怎么用我要的基因做对照呀？不好意思我研一刚接触分子不太懂，麻烦您给我讲下行吗？
...

就是用要检测的基因，如果是整合到基因组就用提的基因组，如果是质粒，就用质粒作为模板，用你的引物pcr试试。

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8楼2016-09-05 19:12:02
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竹在心间

银虫 (小有名气)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:21:29
噢…好像明白了…就是P这个引物的 DNA是不是？

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9楼2016-09-05 19:13:22
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更恋秋风

铁杆木虫 (小有名气)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-06 08:21:36
引用回帖:
9楼: Originally posted by 竹在心间 at 2016-09-05 19:13:22
噢…好像明白了…就是P这个引物的 DNA是不是？

是的

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10楼2016-09-05 19:17:26
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