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SnaB Ⅰ/Avr Ⅱ双酶切切不开的原因？
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实验过程： 1000bp的目的基因连在Blunt simple克隆载体上，NEB的酶，50微升体系，先用Avr Ⅱ切过夜，清洁试剂盒回收后再用SnaB Ⅰ切3h。 说明书上说1h就可以搞定，但我切了3h还是条带很淡（质粒条带很亮）（再久的话会有星号活性），尝试胶回收，但根本看不到回收后的目的条带。 请问，这可能是什么原因呢？ 不知道保护碱基对酶切有没有影响？ 没有找到SnaB Ⅰ的保护碱基，自己随便加了6个（GATCCA） |
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