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16kb质粒点突变问题
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我有一个已经构建好的16kb的质粒，需要突变连续的两个碱基，用takara的prime star GXL 做PCR，引物用的是部分互补引物，pcr反应体系是按照酶的说明书配的。 但pcr产物跑胶总是出现点样孔凝集，转化长出来的菌很少，送测序结果都没有突变，不知道是什么原因。请各位大神帮忙想想办法，万谢！！！  840位突变(2,3,5号引物).jpg  （八号引物）.jpg |
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