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16kb质粒点突变问题
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我有一个已经构建好的16kb的质粒,需要突变连续的两个碱基,用takara的prime star GXL 做PCR,引物用的是部分互补引物,pcr反应体系是按照酶的说明书配的。 但pcr产物跑胶总是出现点样孔凝集,转化长出来的菌很少,送测序结果都没有突变,不知道是什么原因。请各位大神帮忙想想办法,万谢!!! 840位突变(2,3,5号引物).jpg (八号引物).jpg |
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