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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 16kb质粒点突变问题
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少文329

新虫 (初入文坛)

[求助] 16kb质粒点突变问题

我有一个已经构建好的16kb的质粒，需要突变连续的两个碱基，用takara的prime star GXL 做PCR，引物用的是部分互补引物，pcr反应体系是按照酶的说明书配的。
但pcr产物跑胶总是出现点样孔凝集，转化长出来的菌很少，送测序结果都没有突变，不知道是什么原因。请各位大神帮忙想想办法，万谢！！！

16kb质粒点突变问题
840位突变(2,3,5号引物).jpg


16kb质粒点突变问题-1
（八号引物）.jpg
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1楼 2016-08-08 16:21:41
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少文329

新虫 (初入文坛)
唉西，怎么没人回答

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2楼2016-09-04 18:16:56
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兔小白

铁虫 (正式写手)
我以前也遇到这样问题一直没有解决。我p的1,

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3楼2016-09-04 20:31:28
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兔小白

铁虫 (正式写手)
后来换成6000bp的就p出来了

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4楼2016-09-04 20:32:26
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