应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR没有条带
191/2返回列表12下一页
查看: 1814  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

23柚子茶23

新虫 (小有名气)

[求助] PCR没有条带 已有5人参与

这是提的基因组，用的mix体系，退火温度区间是54-64，都没有条带，有大神能分析一下原因吗？

PCR没有条带


@biostar2009 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-07-23 15:50:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

晴空姜

新虫 (正式写手)
contamination  建议buffer DNTP primer等都换新的 另外有阳性对照 阴性对照和TE吗

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2016-07-23 20:37:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

淘七九懒

铁杆木虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-26 22:16:47
首先确定，所用的材料没有问题。你说提的基因组？还是扩增基因组上的目的基因？引物设计也很重要，确定引物没有问题！温度可以从40度开始扩增，一般温度越高特异性越高！希望有所帮助！

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2016-07-25 13:05:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Chsir

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
退火温度，引物特异性，我觉得应该从这两个方面看看，再做个阴性对照，把模板DNA换成灭菌水
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2016-07-25 16:25:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

23柚子茶23

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晴空姜 at 2016-07-23 20:37:41
contamination  建议buffer DNTP primer等都换新的 另外有阳性对照 阴性对照和TE吗

mix体系的东西都是固定好了的，没办法换，你说的阳性和阴性对照分别怎么做？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-07-24 16:27:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不爱做实验

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-26 22:16:23
1、检查DNA提取的质量
2、引物是否具有特异性
3、温度条件是否合适:
    一般可将第一个退火温度适当降低，先获得目的片段，再进行后续多次循环
赞一下 回复此楼
4楼2016-07-24 16:51:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

安静de执着14

新虫 (著名写手)
dna浓度太大，dna模板减少试试。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-07-24 17:06:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

houfuyuan

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
跑得程序呢？用的什么酶？扩长片段要用特定的酶。还有延伸时间加长。
赞一下 回复此楼
玉无瑕，青春无华。
6楼2016-07-24 19:22:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hbtmsw

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-26 22:17:47
要么是引物加多了 ,要么是模板太多或是杂质太多,前面一大片亮的要么是引物二聚体,要么就是模板中美除去的RNA,改进措施是降低引物浓度和模板添加量,提取的基因组最好是用RNA酶处理一下.
赞一下 回复此楼
9楼2016-07-26 09:56:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿尔卑斯英

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
对照Marker多大，怎么看都像是提取的RNA还带着基因组污染。
赞一下 回复此楼
10楼2016-07-26 15:22:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 23柚子茶23 的主题更新
191/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 10:38 by VMDqgnlKimtZ
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:58 by C79jjtjAKjEn
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:58 by C79jjtjAKjEn
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:34 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-15 07:14 by C79jjtjAKjEn
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-15 06:38 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:14 by 5BDX0d0WFp7t
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:01 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-15 05:50 by 5BDX0d0WFp7t
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:50 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-15 05:26 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:13 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-14 22:37 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:13 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:36 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭