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23柚子茶23
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PCR没有条带
已有5人参与
这是提的基因组,用的mix体系,退火温度区间是54-64,都没有条带,有大神能分析一下原因吗?
@
biostar2009
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2016-07-23 15:50:52
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淘七九懒
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专业: 免疫学研究新技术与新方法
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流
2016-07-26 22:16:47
首先确定,所用的材料没有问题。你说提的基因组?还是扩增基因组上的目的基因?引物设计也很重要,确定引物没有问题!温度可以从40度开始扩增,一般温度越高特异性越高!希望有所帮助!
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7楼
2016-07-25 13:05:25
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晴空姜
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contamination 建议buffer DNTP primer等都换新的 另外有阳性对照 阴性对照和TE吗
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2楼
2016-07-23 20:37:41
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23柚子茶23
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2楼
:
Originally posted by
晴空姜
at 2016-07-23 20:37:41
contamination 建议buffer DNTP primer等都换新的 另外有阳性对照 阴性对照和TE吗
mix体系的东西都是固定好了的,没办法换,你说的阳性和阴性对照分别怎么做?
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3楼
2016-07-24 16:27:43
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不爱做实验
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流
2016-07-26 22:16:23
1、检查DNA提取的质量
2、引物是否具有特异性
3、温度条件是否合适:
一般可将第一个退火温度适当降低,先获得目的片段,再进行后续多次循环
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4楼
2016-07-24 16:51:10
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