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jinling158铜虫 (小有名气)
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实时荧光PCR咨询-不胜感激 已有2人参与
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我最近正研制细菌实时荧光PCR检测试剂盒，但是碰到了一些问题，两三个月之前做出的灵敏度还可以，但三个月之后就灵敏度降低了，Ct值增加了2~3，但是试剂什么的都没有变啊。我用的ABI预混液，难道是酶降解了（一直按照说明书4度保存，但其中有一晚上冰箱坏了第2天上午修好了，这个应该不会有影响吧）？另外，难道引物探针也降解了？引物探针的纯化方式是PAGE，这种纯化方式是不是没有离子交换HPLC的纯度和稳定性好啊？都是PAGE纯化，不同公司合成的探针质量是不是不一样呢？宝生物销售跟我说他们合成的探针质量好。又或是我的DNA降解了？对于低浓度的质粒DNA，有没有好的保存方法啊？比如说用低吸附的管子，里面要加一些什么样的保护剂吗？负20度还是负80度保存呢？ 谢谢各位！对您的答复不胜感激！ |
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