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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 薄层层析跑出来呈带状，原点处一直拖不上去是怎么回事？
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summer小兰

新虫 (初入文坛)

[交流] 薄层层析跑出来呈带状，原点处一直拖不上去是怎么回事？

各位大神，我在做对真菌代谢产物未知成分的分离，先是培养15天，再过滤、离心除去菌丝，我用甲醇多次除去沉淀，上清液显示有生物活性，然后采用薄层层析分离上清液。想提纯该物质，弄清到底是哪一种东西的生物活性最强。采用的是硅胶G板，展开剂是甲醇-正丁醇-水，加少量醋酸，10%硫酸乙醇显色时烘到整块板子都变色了分离物也未显色，之后就采用碘蒸气显色，试到甲醇：正丁醇：水：醋酸=5:3:1:1时结果从头到尾都是条带状，没有分离开的圆点，现在也没有头绪，不知道该怎么再继续下去，请教各位帮忙分析一下，谢谢。金币少也不要嫌弃哈。。。。

薄层层析跑出来呈带状，原点处一直拖不上去是怎么回事？
碘蒸气显色.jpg


薄层层析跑出来呈带状，原点处一直拖不上去是怎么回事？-1
硫酸乙醇显色.jpg
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1楼 2016-07-13 14:34:48
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youyuanwin

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
第一：化合物极性太大，你的系统跑不起来
第二：粗样杂质太多，呈带状，掩盖了你的主要化合物
第三：点板技术有待提高，毛细管沾取一点点，并用甲醇稀释一下，点完之后，沾取纯甲醇稀释一下
第四：如果样品量够大，建议再上一次凝胶或者反相（不要上硅胶），划段，测活，再点板分离，这样会清晰很多
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11楼2016-07-15 10:39:35
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liuhanjz

新虫 (著名写手)
★
summer小兰(金币+1): 谢谢参与
顶一下.....
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4楼2016-07-13 15:25:12
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wangxiaop

新虫 (著名写手)
★
summer小兰(金币+1): 谢谢参与
好人好运
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5楼2016-07-13 15:25:18
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qindanc

新虫 (著名写手)
★
summer小兰(金币+1): 谢谢参与
好人好运
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6楼2016-07-13 15:26:57
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矢车菊2012

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
多换几个体系试试啊

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8楼2016-07-13 16:26:17
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小熊的哈比

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
试到甲醇：正丁醇：水：醋酸=5:3:1:1这比例不合适，或者说扩展剂不合适，你调比例或者换试剂，你可以试一试香草醛显示剂，能不不同物质显出不同颜色
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9楼2016-07-14 14:31:43
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summer小兰

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 小熊的哈比 at 2016-07-14 14:31:43
试到甲醇：正丁醇：水：醋酸=5:3:1:1这比例不合适，或者说扩展剂不合适，你调比例或者换试剂，你可以试一试香草醛显示剂，能不不同物质显出不同颜色

好的  我试试  谢谢
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10楼2016-07-14 21:45:49
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summer小兰

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by youyuanwin at 2016-07-15 10:39:35
第一：化合物极性太大，你的系统跑不起来
第二：粗样杂质太多，呈带状，掩盖了你的主要化合物
第三：点板技术有待提高，毛细管沾取一点点，并用甲醇稀释一下，点完之后，沾取纯甲醇稀释一下
第四：如果样品量够大 ...

你好，请问用甲醇稀释的目的是什么呢？这个不太懂，是沾了样品接着沾甲醇再点样吗？还有就是一定得过凝胶才能分开吗？实验室好像只有硅胶，凝胶的种类也有很多，那应该从哪些方面来选择呢？谢谢回答。
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12楼2016-07-15 17:37:38
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summer小兰

新虫 (初入文坛)
换了一下比例，请教一下为什么薄层板前面跑出月牙形状。
薄层层析跑出来呈带状，原点处一直拖不上去是怎么回事？-2
甲醇，正丁醇，水，氨水=4.5，1，1，0.5.jpg
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13楼2016-07-15 17:40:43
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zhutao41

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用石油醚乙酸乙酯 ，二氯甲烷甲醇体系不同比例试试
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14楼2016-07-15 21:49:08
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匿名

用户注销 (小有名气)
本帖仅楼主可见
15楼2016-11-07 23:39:25
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shanliwademen

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by summer小兰 at 2016-07-15 17:37:38
你好，请问用甲醇稀释的目的是什么呢？这个不太懂，是沾了样品接着沾甲醇再点样吗？还有就是一定得过凝胶才能分开吗？实验室好像只有硅胶，凝胶的种类也有很多，那应该从哪些方面来选择呢？谢谢回答。...

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16楼2016-11-10 15:31:39
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xhmaohan2楼
2016-07-13 15:08   回复  
summer小兰(金币+1): 谢谢参与
jixiangbao3楼
2016-07-13 15:09   回复  
summer小兰(金币+1): 谢谢参与
假大空7楼
2016-07-13 15:27   回复  
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