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summer小兰

新虫 (初入文坛)


[交流] 薄层层析跑出来呈带状,原点处一直拖不上去是怎么回事?

各位大神,我在做对真菌代谢产物未知成分的分离,先是培养15天,再过滤、离心除去菌丝,我用甲醇多次除去沉淀,上清液显示有生物活性,然后采用薄层层析分离上清液。想提纯该物质,弄清到底是哪一种东西的生物活性最强。采用的是硅胶G板,展开剂是甲醇-正丁醇-水,加少量醋酸,10%硫酸乙醇显色时烘到整块板子都变色了分离物也未显色,之后就采用碘蒸气显色,试到甲醇:正丁醇:水:醋酸=5:3:1:1时结果从头到尾都是条带状,没有分离开的圆点,现在也没有头绪,不知道该怎么再继续下去,请教各位帮忙分析一下,谢谢。金币少也不要嫌弃哈。。。。

薄层层析跑出来呈带状,原点处一直拖不上去是怎么回事?
碘蒸气显色.jpg


薄层层析跑出来呈带状,原点处一直拖不上去是怎么回事?-1
硫酸乙醇显色.jpg
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youyuanwin

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
第一:化合物极性太大,你的系统跑不起来
第二:粗样杂质太多,呈带状,掩盖了你的主要化合物
第三:点板技术有待提高,毛细管沾取一点点,并用甲醇稀释一下,点完之后,沾取纯甲醇稀释一下
第四:如果样品量够大,建议再上一次凝胶或者反相(不要上硅胶),划段,测活,再点板分离,这样会清晰很多
11楼2016-07-15 10:39:35
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liuhanjz

新虫 (著名写手)



summer小兰(金币+1): 谢谢参与
顶一下.....
4楼2016-07-13 15:25:12
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wangxiaop

新虫 (著名写手)



summer小兰(金币+1): 谢谢参与
好人好运
5楼2016-07-13 15:25:18
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qindanc

新虫 (著名写手)



summer小兰(金币+1): 谢谢参与
好人好运
6楼2016-07-13 15:26:57
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矢车菊2012

新虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
多换几个体系试试啊

发自小木虫Android客户端
8楼2016-07-13 16:26:17
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小熊的哈比

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
试到甲醇:正丁醇:水:醋酸=5:3:1:1这比例不合适,或者说扩展剂不合适,你调比例或者换试剂,你可以试一试香草醛显示剂,能不不同物质显出不同颜色
9楼2016-07-14 14:31:43
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summer小兰

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
9楼: Originally posted by 小熊的哈比 at 2016-07-14 14:31:43
试到甲醇:正丁醇:水:醋酸=5:3:1:1这比例不合适,或者说扩展剂不合适,你调比例或者换试剂,你可以试一试香草醛显示剂,能不不同物质显出不同颜色

好的  我试试  谢谢
10楼2016-07-14 21:45:49
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summer小兰

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
11楼: Originally posted by youyuanwin at 2016-07-15 10:39:35
第一:化合物极性太大,你的系统跑不起来
第二:粗样杂质太多,呈带状,掩盖了你的主要化合物
第三:点板技术有待提高,毛细管沾取一点点,并用甲醇稀释一下,点完之后,沾取纯甲醇稀释一下
第四:如果样品量够大 ...

你好,请问用甲醇稀释的目的是什么呢?这个不太懂,是沾了样品接着沾甲醇再点样吗?还有就是一定得过凝胶才能分开吗?实验室好像只有硅胶,凝胶的种类也有很多,那应该从哪些方面来选择呢?谢谢回答。
12楼2016-07-15 17:37:38
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summer小兰

新虫 (初入文坛)


换了一下比例,请教一下为什么薄层板前面跑出月牙形状。
薄层层析跑出来呈带状,原点处一直拖不上去是怎么回事?-2
甲醇,正丁醇,水,氨水=4.5,1,1,0.5.jpg

13楼2016-07-15 17:40:43
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zhutao41

至尊木虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用石油醚乙酸乙酯 ,二氯甲烷甲醇体系不同比例试试
14楼2016-07-15 21:49:08
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匿名

用户注销 (小有名气)


本帖仅楼主可见
15楼2016-11-07 23:39:25
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shanliwademen

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by summer小兰 at 2016-07-15 17:37:38
你好,请问用甲醇稀释的目的是什么呢?这个不太懂,是沾了样品接着沾甲醇再点样吗?还有就是一定得过凝胶才能分开吗?实验室好像只有硅胶,凝胶的种类也有很多,那应该从哪些方面来选择呢?谢谢回答。...

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发自小木虫Android客户端
16楼2016-11-10 15:31:39
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xhmaohan2楼
2016-07-13 15:08   回复  
summer小兰(金币+1): 谢谢参与
2016-07-13 15:09   回复  
summer小兰(金币+1): 谢谢参与
假大空7楼
2016-07-13 15:27   回复  
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