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薄层层析跑出来呈带状,原点处一直拖不上去是怎么回事?
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summer小兰
新虫
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在线: 8小时
虫号: 3076310
[交流]
薄层层析跑出来呈带状,原点处一直拖不上去是怎么回事?
各位大神,我在做对真菌代谢产物未知成分的分离,先是培养15天,再过滤、离心除去菌丝,我用甲醇多次除去沉淀,上清液显示有生物活性,然后采用薄层层析分离上清液。想提纯该物质,弄清到底是哪一种东西的生物活性最强。采用的是硅胶G板,展开剂是甲醇-正丁醇-水,加少量醋酸,10%硫酸乙醇显色时烘到整块板子都变色了分离物也未显色,之后就采用碘蒸气显色,试到甲醇:正丁醇:水:醋酸=5:3:1:1时结果从头到尾都是条带状,没有分离开的圆点,现在也没有头绪,不知道该怎么再继续下去,请教各位帮忙分析一下,谢谢。金币少也不要嫌弃哈。。。。
碘蒸气显色.jpg
硫酸乙醇显色.jpg
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2016-07-13 14:34:48
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youyuanwin
金虫
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虫号: 2609825
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
第一:化合物极性太大,你的系统跑不起来
第二:粗样杂质太多,呈带状,掩盖了你的主要化合物
第三:点板技术有待提高,毛细管沾取一点点,并用甲醇稀释一下,点完之后,沾取纯甲醇稀释一下
第四:如果样品量够大,建议再上一次凝胶或者反相(不要上硅胶),划段,测活,再点板分离,这样会清晰很多
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11楼
2016-07-15 10:39:35
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矢车菊2012
新虫
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
多换几个体系试试啊
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8楼
2016-07-13 16:26:17
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小熊的哈比
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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
试到甲醇:正丁醇:水:醋酸=5:3:1:1这比例不合适,或者说扩展剂不合适,你调比例或者换试剂,你可以试一试香草醛显示剂,能不不同物质显出不同颜色
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9楼
2016-07-14 14:31:43
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summer小兰
新虫
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9楼
:
Originally posted by
小熊的哈比
at 2016-07-14 14:31:43
试到甲醇:正丁醇:水:醋酸=5:3:1:1这比例不合适,或者说扩展剂不合适,你调比例或者换试剂,你可以试一试香草醛显示剂,能不不同物质显出不同颜色
好的 我试试 谢谢
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10楼
2016-07-14 21:45:49
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