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aoda123

木虫 (正式写手)

[求助] 盐酸胍溶解包涵体释放出目的蛋白后,溶液不能挂Ni柱子? 已有3人参与

目的蛋白带有His标签,在包涵体中表达,用6M盐酸胍溶解包涵体后,上清与Ni柱孵育,但是目的蛋白不能挂上Ni柱。

盐酸胍会影响蛋白结合吗?
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身体健康,工作顺利
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feixieliuli

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-08-12 22:33:38
不知道为什么这个帖子没人回复。盐酸胍溶解蛋白不会影响Ni柱的呀,只是不能跑SDS-PAGE电泳而已。
不念过去,不畏将来
2楼2016-08-12 16:04:54
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aoda123

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by feixieliuli at 2016-08-12 20:04:54
不知道为什么这个帖子没人回复。盐酸胍溶解蛋白不会影响Ni柱的呀,只是不能跑SDS-PAGE电泳而已。

我做的溶液比较粘稠挂柱效果不好
身体健康,工作顺利
3楼2016-08-12 16:52:50
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feixieliuli

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by aoda123 at 2016-08-12 16:52:50
我做的溶液比较粘稠挂柱效果不好...

比较黏是什么原因?是核酸可以超声打断,要是甘油之类的那你就稀释一下好了。
不念过去,不畏将来
4楼2016-08-12 17:14:02
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退后cpu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也用盐酸胍变性上柱,特别伤柱子,但是能挂上,你盐酸胍配方是什么啊
5楼2016-08-30 11:56:15
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xuegyx

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

没碰到楼主的情况,我以前做过能挂上的
6楼2016-08-30 16:08:26
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aoda123

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 退后cpu at 2016-08-30 15:56:15
我也用盐酸胍变性上柱,特别伤柱子,但是能挂上,你盐酸胍配方是什么啊

用裂解液溶解6M的盐酸胍,溶液比较粘,溶解细菌以后更粘稠
身体健康,工作顺利
7楼2016-08-30 16:57:32
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