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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 盐酸胍溶解包涵体释放出目的蛋白后，溶液不能挂Ni柱子？
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aoda123

木虫 (正式写手)

[求助] 盐酸胍溶解包涵体释放出目的蛋白后，溶液不能挂Ni柱子？ 已有3人参与

目的蛋白带有His标签，在包涵体中表达，用6M盐酸胍溶解包涵体后，上清与Ni柱孵育，但是目的蛋白不能挂上Ni柱。

盐酸胍会影响蛋白结合吗？
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身体健康，工作顺利
1楼 2016-07-12 21:58:43
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aoda123

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by feixieliuli at 2016-08-12 20:04:54
不知道为什么这个帖子没人回复。盐酸胍溶解蛋白不会影响Ni柱的呀，只是不能跑SDS-PAGE电泳而已。

我做的溶液比较粘稠挂柱效果不好
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身体健康，工作顺利
3楼2016-08-12 16:52:50
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feixieliuli

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-08-12 22:33:38
不知道为什么这个帖子没人回复。盐酸胍溶解蛋白不会影响Ni柱的呀，只是不能跑SDS-PAGE电泳而已。
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不念过去，不畏将来
2楼2016-08-12 16:04:54
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feixieliuli

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by aoda123 at 2016-08-12 16:52:50
我做的溶液比较粘稠挂柱效果不好...

比较黏是什么原因？是核酸可以超声打断，要是甘油之类的那你就稀释一下好了。
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不念过去，不畏将来
4楼2016-08-12 17:14:02
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退后cpu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也用盐酸胍变性上柱，特别伤柱子，但是能挂上，你盐酸胍配方是什么啊
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5楼2016-08-30 11:56:15
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