| 查看: 1592 | 回复: 13 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
yuguiyan至尊木虫 (文坛精英)
|
[求助]
原核表达想做SDS PAGE怎么处理样品 已有2人参与
|
|
|
用的是pGEX.载体，菌液想做SDS PAGE应该如何处理样品呀？ 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有72人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
yuguiyan
至尊木虫 (文坛精英)
- 应助: 277 (大学生)
- 金币: 15912.3
- 散金: 451
- 红花: 78
- 沙发: 433
- 帖子: 21986
- 在线: 2078.9小时
- 虫号: 2029722
- 注册: 2012-09-25
- 专业: 原子和分子物理
4楼2016-07-10 21:21:53
2楼2016-07-10 12:40:01
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-07-11 07:04:28
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-07-11 07:04:28
|
是大肠杆菌么？一般简单检测直接菌体煮沸即可用于上样，也可以超声破碎后，将上清沉淀都检测，看看目的蛋白表达情况。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-07-10 20:54:50
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
xn8008: 应助指数+1 2016-07-11 07:04:40
|
如果是大肠杆菌的话，就是你收集菌体，用PBS缓冲液重悬一下，一般2mM ph7.0 PBS就可以，实在没有用水也可以，重悬一般是比原有菌液浓缩十倍左右吧，具体超声参数我记不得了，不同意思效果不一，不过大肠还是很好破碎的，不需要额外加裂解液，破碎完以后，离心将上清沉淀分离。沉淀用和上清等体积的PBS重悬，然后取一些加loading buffer进行检测，看你的目的蛋白是在上清还是包涵体内，祝好。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-07-10 21:49:06
20