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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 农杆菌转化后菌落PCR就是不出目的条带，求助。
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damaoouba

木虫 (正式写手)

[求助] 农杆菌转化后菌落PCR就是不出目的条带，求助。 已有3人参与

事情是这样的。

目的片段连载体，提取质粒后质粒送测序，没有问题。
然后质粒转农杆菌，4天长出菌落。
挑菌划线后进行菌落PCR，但是就是没有目的条带。。。
咋回事呢？？？？可能是哪一步出了问题？？
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1楼 2016-07-06 14:35:28
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
菌落PCR的时候最好把菌放在无菌水里煮一下，离心，取上清做模板
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3楼2016-07-06 16:04:39
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 鼓励发帖交流 2016-07-07 08:30:51
四天才长出菌落？假阳性吧。长的菌落提质粒了吗？农杆菌的感受态确定没有问题吗？确定没有问题的话，建议重新转化。
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2楼2016-07-06 14:40:23
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这太笼统了，把你实验的过程和实验的对照都写出来呀。
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采菊东篱下，悠然见南山。
4楼2016-07-06 16:44:46
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damaoouba

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2016-07-06 16:04:39
菌落PCR的时候最好把菌放在无菌水里煮一下，离心，取上清做模板

这是为什么呢？？
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5楼2016-07-07 08:44:22
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