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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量PCR Ct值
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L笨小孩

铜虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR Ct值 已有7人参与

我做了相同的稀释倍数后发现目的基因的Ct值好多都是三十多，而内参基因的都是二十多，请问这样的数据能用吗？
做荧光定量PCR，目的基因和内参基因的模板稀释倍数一定要一样吗？不一样的话，比如目的基因模板稀释10倍，内参不稀释，这样可行吗？
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1楼 2016-06-24 19:58:33
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Harper_sun

木虫 (正式写手)
当然得一样，要不你跑内参基因干啥？

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3楼2016-06-24 23:04:19
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棍子168

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-25 08:41:11
xn8008: 应助指数+1 2016-06-25 08:47:22
Ct值好多都是三十多，而内参基因的都是二十多，说明你的目的基因表达量也太少了吧，目的基因和内参基因的模板稀释倍数一定要一样吧，要不然没有意义吧
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天道酬勤
2楼2016-06-24 20:06:12
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-25 08:41:41
xn8008: 应助指数+1 2016-06-25 08:47:31
Ct30以后就不准了，不能用。稀释倍数必需一样，像你这样的最好换一个表达量第一点的内参基因。
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4楼2016-06-25 07:40:12
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ldx832

新虫 (初入文坛)
只要你30多的目的基因能和阴性分开就可以用啊，目的基因和内参基因的CT大多数情况是不一样的。稀释倍数一定要一致，加内参的目的就是在相同模板里你的目的基因和内参基因分别是多少，然后用内参基因来标定目标基因的量（内参基因视为表达量为不变）。

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5楼2016-06-25 08:55:05
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