| 查看: 5028 | 回复: 9 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
sdjnyxn123银虫 (小有名气)
|
[求助]
请问蛋白镍柱纯化之后，elution buffer洗脱下来的蛋白跟之前没什么区别是怎么回事 已有5人参与
|
||
 是生工的这种镍柱  先用bind/wash buffer平衡2h 之后加入样品（大肠杆菌细胞破碎后的上清），静置半小时后，流出的液体是右边第二个泳道的 然后wash buffer洗脱两次 最后加入elution buffer，静置半小时后得到纯化样品 3个样品分别进行了SDS-PAGE看了一下 结果发现基本上没有什么太大的变化，还是那些杂蛋白 试剂盒时间有点长，14年买的，但是我再生过，不过bind/wash buffer和elution buffer没有处理过 是这两个的问题吗？ 一直纯化不成功，很苦恼，希望知道的朋友能够帮助一下！非常感谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有282人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
-
133 Ų 的极性表面积，如何决定 TNG462 的母液配制与色谱条件
已经有0人回复
-
两个氟原子与一段氨基甲酸甲酯：BLU-5937 的母液配制与稳定性边界
已经有0人回复
-
司美那非（TPN171）：从嘧啶酮母核到工艺放大的结构、色谱与质控参数解析
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-25 08:43:33
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-25 08:43:33
|
你没有做梯度洗脱么，可以优化一下洗脱条件，尽量分离开不同蛋白 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-06-20 17:30:04
2楼2016-06-20 17:17:14
hc-material
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +702 - 应助: 517 (博士)
- 金币: 468.5
- 散金: 18028
- 红花: 313
- 帖子: 3594
- 在线: 518.9小时
- 虫号: 4027804
- 注册: 2015-08-18
- 性别: GG
- 专业: 核技术及其应用
- 管辖: 生物科学
4楼2016-06-21 10:22:33
5楼2016-06-21 14:43:13
