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sdjnyxn123银虫 (小有名气)
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请问蛋白镍柱纯化之后，elution buffer洗脱下来的蛋白跟之前没什么区别是怎么回事 已有5人参与
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 是生工的这种镍柱  先用bind/wash buffer平衡2h 之后加入样品（大肠杆菌细胞破碎后的上清），静置半小时后，流出的液体是右边第二个泳道的 然后wash buffer洗脱两次 最后加入elution buffer，静置半小时后得到纯化样品 3个样品分别进行了SDS-PAGE看了一下 结果发现基本上没有什么太大的变化，还是那些杂蛋白 试剂盒时间有点长，14年买的，但是我再生过，不过bind/wash buffer和elution buffer没有处理过 是这两个的问题吗？ 一直纯化不成功，很苦恼，希望知道的朋友能够帮助一下！非常感谢！ |
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2楼2016-06-20 17:17:14
原海亮
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你没有做梯度洗脱么，可以优化一下洗脱条件，尽量分离开不同蛋白 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-06-20 17:30:04
hc-material
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tmoonday
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自己做梯度，咪坐浓度，40，100，150，200，250.试试，不用静置，直接洗脱，收集 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-06-23 00:10:21
7楼2016-06-24 17:38:28
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8楼2016-06-25 00:49:26
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his标签很麻烦的，最基础的纯化而已，不要以为可以纯得多干净，但也不至于这样子，先搞个梯度试试，剩下两三条杂带后可以用切gel的方法，his不可能纯的 发自小木虫IOS客户端 |
9楼2016-06-25 01:26:24
10楼2016-06-25 01:30:31
