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黄启秀

新虫 (正式写手)

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专业: 生物物理、生物化学与分子

[求助] 菌P 酶切已有1人参与

菌P成功，且条带都非常好，可酶切不成功条带不对，如图第一张是菌P的图第二张是提质粒后酶切跑胶图，质粒大小9600多连接片段400多，是小片段酶切看不清楚么，或是酶切条件有问题，还是连接不成功？

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1楼 2016-06-08 21:34:21

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黄启秀

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引用回帖:

7楼: Originally posted by 苏莫离 at 2016-06-13 15:54:43
建议加大质粒的量尝试。近期也在做载体构建，我要连接的目的基因片段也是400多bp。第一次酶切后目的条带特别浅，然后分别加大质粒的量至二倍、三倍，三倍时得到了较理想的亮条带。顺便提一句，我提取的质粒浓度在30 ...

我的双酶切酶一个是快酶（切20分钟）一个是慢酶（要切1-16小时）我把两个加一起 20ul体系切了大概两个半小时，只加了快切酶的Buffer 请问这样切可以么？

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